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donghuayang銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】質粒提取后酶切不動 已有10人參與
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| 我提取的質粒按照正規(guī)操作完成，可就是酶切不完全，即使是48小時以后也不能完全酶切，請問誰知道會是什么原因呢？謝謝 |
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2樓2010-05-22 23:12:03
sushang
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3樓2010-05-23 00:06:34
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
donghuayang(金幣+1):是的，我也出現(xiàn)過從一個菌株提取出來的質粒轉化到另外的菌種里邊去后提取出的質粒不正常 2010-05-23 13:06:47
scelab(金幣+3):歡迎多來交流！:tiger06: 2010-05-24 22:54:40
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
donghuayang(金幣+1):是的，我也出現(xiàn)過從一個菌株提取出來的質粒轉化到另外的菌種里邊去后提取出的質粒不正常 2010-05-23 13:06:47
scelab(金幣+3):歡迎多來交流！:tiger06: 2010-05-24 22:54:40
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可能的原因： 使用了非克隆菌株。DNA發(fā)生甲基化等修飾 使用了不常用的酶，如SacII，這種酶因未知的原因對某些本應是別的序列確實切不開。 酶的活性有問題。是不是加多了（甘油太多會影響活性），或是酶本身有問題。使用NEB的酶切一下試試。 |
4樓2010-05-23 01:32:13
hiking8715
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10樓2010-05-25 08:27:38
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