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donghuayang銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】質(zhì)粒提取后酶切不動(dòng) 已有10人參與
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| 我提取的質(zhì)粒按照正規(guī)操作完成，可就是酶切不完全，即使是48小時(shí)以后也不能完全酶切，請(qǐng)問(wèn)誰(shuí)知道會(huì)是什么原因呢？謝謝 |
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hiking8715
金蟲 (小有名氣)
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5樓2010-05-23 09:13:23
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3樓2010-05-23 00:06:34
goodwish
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
donghuayang(金幣+1):是的，我也出現(xiàn)過(guò)從一個(gè)菌株提取出來(lái)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到另外的菌種里邊去后提取出的質(zhì)粒不正常 2010-05-23 13:06:47
scelab(金幣+3):歡迎多來(lái)交流！:tiger06: 2010-05-24 22:54:40
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
donghuayang(金幣+1):是的，我也出現(xiàn)過(guò)從一個(gè)菌株提取出來(lái)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到另外的菌種里邊去后提取出的質(zhì)粒不正常 2010-05-23 13:06:47
scelab(金幣+3):歡迎多來(lái)交流！:tiger06: 2010-05-24 22:54:40
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可能的原因： 使用了非克隆菌株。DNA發(fā)生甲基化等修飾 使用了不常用的酶，如SacII，這種酶因未知的原因?qū)δ承┍緫?yīng)是別的序列確實(shí)切不開。 酶的活性有問(wèn)題。是不是加多了（甘油太多會(huì)影響活性），或是酶本身有問(wèn)題。使用NEB的酶切一下試試。 |
4樓2010-05-23 01:32:13
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