 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 752 | 回復(fù): 1 | |||
wangchaokai銀蟲 (初入文壇)
|
[交流]
【求助/交流】怎樣分離乳酸菌 已有1人參與
|
| 本人由于工作的需要，要從泡菜或酸奶中分離乳酸菌，哪位蟲友做過的給指點(diǎn)一下哈，最好有培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)方法和乳酸菌菌落的鑒別，謝謝！如有資料可以發(fā)下面郵箱：gswangchaokai@126.com |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
0703化學(xué) 305求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿211，0703化學(xué)310分求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
廣西大學(xué)材料導(dǎo)師推薦
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分)
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
269專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085600材料與化工306
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
材料求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 蟲生細(xì)菌常規(guī)分離方法
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 如提高乳酸菌菌數(shù)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 如何判定分離處理的菌落是純的？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 乳酸菌的生理生化鑒定試驗(yàn)中 各種糖的添加量怎么算？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 可在食品生產(chǎn)中或食品中應(yīng)用的菌都有哪些？國家有沒有什么規(guī)定？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助】HPLC 問題分析
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助】？？分離菌種 求助啊
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)問乳酸菌產(chǎn)酸鑒別培養(yǎng)基配方
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 大家有沒有做乳酸菌的？交流一下
已經(jīng)有22人回復(fù)
dhd997
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
自由人，我型我秀！
- 應(yīng)助: 24 (小學(xué)生)
- 貴賓: 4.021
- 金幣: 22094.4
- 散金: 1968
- 紅花: 45
- 沙發(fā): 161
- 帖子: 22410
- 在線: 927.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 500412
- 注冊(cè): 2008-02-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化工與食品化工
- 管轄: 分子生物
★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
scelab(金幣+2):辛苦~~~ 2010-05-23 21:19:29
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
scelab(金幣+2):辛苦~~~ 2010-05-23 21:19:29
|
資料來源 http://zhidao.baidu.com/question/5984447.html 我也在做這個(gè)，下面是我整理的，時(shí)間關(guān)系只能這樣了，可以看看。都要求無菌操作 菌種的分離 取lmL鹵汁以10倍遞增稀釋方法（一份泡菜汁，九份無菌水，再取一份第一只管中溶液，加九份無菌水，依次類推），將其稀釋至1/10～10的-10次冪（我打不上去），然后從不同濃度稀 釋液中分別取lmL傾注在平皿中，再倒入培養(yǎng)基相混合，待培養(yǎng)基凝固后倒置于30~C恒溫下 培養(yǎng)48h。挑取長勢(shì)良好的單個(gè)茵落劃線分純，直至純化(茵落單個(gè)大小一致，革蘭氏染色鏡 檢，茵體一致)。結(jié)果分離得到3株不同菌株，分別編號(hào)為菌株1、菌株2、菌株3。再分別轉(zhuǎn)移 到試管斜面上進(jìn)行保存。 分離用培養(yǎng)基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，蒸餾水1 000 mL，瓊脂20g，pH7．0—7．2 ；保存用斜面培養(yǎng)基：酵母膏1％ ，碳酸鈣2％ ，葡萄糖1％ ，瓊脂2％ ，pH 7．0。 培養(yǎng)條件 將分離出的菌株1、菌株2、菌株3分別接種在上述4種不同的培養(yǎng)基上， 在30�！�=恒溫條件下培養(yǎng)48h后觀察并測(cè)定其培養(yǎng)結(jié)果。 測(cè)定方法 菌落總數(shù)采用逐級(jí)稀釋法來計(jì)數(shù)；pH值用pHS一2C酸度計(jì)測(cè)定；乳酸定性 及含量測(cè)定依據(jù)食品檢驗(yàn)技術(shù) 1I．2．1乳酸菌的分離與篩選的試驗(yàn)程序 自然發(fā)酵酸菜汁液一稀釋一培養(yǎng)一挑起單菌落染色、鏡檢一挑 選革蘭氏陽性球菌單菌落一Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基一挑選溶鈣圈大的球菌反復(fù)在Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基上幾次純化篩選一單菌落優(yōu) 良菌株一試管穿刺低溫保存。 1．2 1．2 乳酸菌的鑒定 用光學(xué)顯微鏡、放大鏡進(jìn)行乳酸菌的形態(tài)特征鑒定。生理生化特征鑒定：產(chǎn)乳 酸定性試驗(yàn)——乳酸紙層析法0- 、過氧化氫酶(接觸酶)反應(yīng)⋯、明膠水解反應(yīng) 、硫化氫反應(yīng) 、乳酸菌 發(fā)酵營養(yǎng)型試驗(yàn)0 、耐鹽、酸、溫度試驗(yàn)。 1．2．I．3 乳酸菌的保存⋯ 采用定期移植低溫保藏法。培養(yǎng)基配方：葡萄糖1％ 、蛋白胨0 2％ 、 l(}l2PQ|0．2％、瓊脂20％、pH值7 0，分裝試管，121。c滅菌30min。將使用對(duì)數(shù)生長期后期的細(xì)胞進(jìn)行穿刺 培養(yǎng)，然后密封存于冰箱玲藏室內(nèi)(5qc左右)，2個(gè)月移植1次。 1．2．2 分離乳酸菌的生理特點(diǎn)試驗(yàn) 1 2 2．1 最適生長溫度的測(cè)定OD值以同溫下不接種培養(yǎng)基作對(duì)照，定期取出接種培養(yǎng)基在721分光光度 計(jì)上，用最大吸收光波長 =6001RIifl測(cè)定。 1．2．2．2 生長周期的測(cè)定oD值(方法同上)；pH值：PHB一4pH計(jì)；可滴定酸(以乳酸計(jì))：吸取ImL菌液 加入9Ⅱ1L蒸餾水，加入1～2滴酚酞，用0．1NNaOH滴定。 1．2 2．3 最適pH值的測(cè)試、最適鹽濃度的測(cè)試。 供試樣品及培養(yǎng)基 分離用樣品：泡菜汁、酸奶及西紅柿均為市售 分離用培養(yǎng)基：①BCP培養(yǎng)基：酵母膏2 5g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0 04g，瓊脂15g， 蒸槽水lO00ml，pH7 0；②MRS培養(yǎng)基見文獻(xiàn) 。 菌種保藏用培養(yǎng)基：脫脂乳培養(yǎng)基：新鮮牛乳離心去掉上層乳脂，下層奶液分裝試管，105℃ 滅菌20mln。 菌利 鑒定用培養(yǎng)基見文獻(xiàn) 6。 1 2 方法 1 2 1 乳酸菌的分離純化 取泡菜汁、酸奶、西紅柿表面洗液進(jìn)行梯度稀釋，分別用傾注法、涂布 法和劃線法在BCP和MRS培養(yǎng)基平板上進(jìn)行菌種分離。挑取在BCP平板上有透明目的菌落，在 MRS平扳上有溶鈣圈的菌落，反復(fù)純化至純種，挑菌至脫脂牛奶試管中保存 1．2 2 乳酸菌復(fù)篩對(duì)初篩菌株進(jìn)行革蘭氏染色，保留革蘭氏陽性菌株．并對(duì)其所產(chǎn)乳酸能力進(jìn) 行定性、定量分析，篩選出產(chǎn)酸高的菌株保存，再把產(chǎn)酸高的菌株經(jīng)蘿l、汁發(fā)酵 】，進(jìn)一步選擇產(chǎn) 酸高、_l】味純正的菌株保存鑒定 1 2 3 乳酸定性測(cè)定果用紙層析法。溶劑系統(tǒng)為乙醇：濃氨水：水=80：5：15，顯色劑為0 04％ 的溴甲酚紫酒精溶液。層析時(shí)將乳酸、檸檬酸配成1％ 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液 及乳酸發(fā)酵液 均點(diǎn)樣3 ．上行層析，顯色與標(biāo)準(zhǔn)樣比較 1．2 4 乳酸的定量測(cè)定采用氣相色譜法，利用芐酯化法制備乳酸衍生物，將待測(cè)乳酸菌株在產(chǎn) 酸培養(yǎng)基內(nèi)37"C培養(yǎng)3d，離心。取上清液剃備衍生物，氣相色譜分析含量。氣相色譜工作條件為： EGS色譜柱，柱溫160'C，氣化溫度180'17．，檢測(cè)器溫度l70"C，載氣為N，。 1．2 5 菌種鑒定根據(jù)《簡明第八版伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》 和《一般細(xì)菌常用鑒定手冊(cè)》[6 對(duì)復(fù)篩 出的菌株的形態(tài)、生理生化、碳源利用等方面進(jìn)行系統(tǒng)鑒定，并提取乳酸菌株DNA，采用熔鏈溫度 法捌G+C％含量 J。 |
2樓2010-05-23 20:57:41
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 wangchaokai 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 269專碩求調(diào)劑 +4 | 金恩貝 2026-03-21 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +7 | 26研0 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 本人考085602 化學(xué)工程 專碩 +20 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +9 | 煙火先于春 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 26考研一志愿中國石油大學(xué)(華東)305分求調(diào)劑 +6 | 嘉年新程 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286分人工智能專業(yè)請(qǐng)求調(diào)劑愿意跨考！ +4 | lemonzzn 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085601調(diào)劑 358分 +3 | zzzzggh 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +15 | 陌の森林 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +4 | 小材化本科 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京理工大學(xué)085701資源與環(huán)境302分求調(diào)劑 +4 | 葵梓衛(wèi)隊(duì) 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué) 學(xué)碩 354求調(diào)劑211或者雙一流 +3 | 我想要讀研究生 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
 0854，計(jì)算機(jī)類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +3 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調(diào)劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|