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天山腳下金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】有關(guān)western-blot的一些問題 已有10人參與
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分子量大小為21kd的蛋白，用厚度為1.5mm的凝膠。 做SDS-PAGE電泳時(shí)的電壓也是積層膠70V，分離膠100V么？ 用PVDF膜濕轉(zhuǎn)的時(shí)候，比較合適的電流和時(shí)間是多少？ O(∩_∩)O~ |
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hflf
金蟲 (小有名氣)
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天山腳下(金幣+1): 2010-05-27 15:15:34
lstt09nk(金幣+1):歡迎多多交流~~ 2010-06-23 12:40:12
天山腳下(金幣+1): 2010-05-27 15:15:34
lstt09nk(金幣+1):歡迎多多交流~~ 2010-06-23 12:40:12
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前幾天剛做過(guò)western-blot，我的蛋白大小是14kd，我當(dāng)時(shí)用的條件是 PVDF膜濕轉(zhuǎn),200mA 50min 結(jié)果發(fā)現(xiàn)marker34kd都全部轉(zhuǎn)過(guò)去了，所以你那個(gè)21kd的建議用200mA 30min應(yīng)該沒問題的，至于做SDS-PAGE電泳 我用的是積層膠10mA，分離膠20mA,具體時(shí)間看你的條帶在膠中的位置以便做下步的western-blot。 |
7樓2010-05-27 09:42:12
xj22667
銀蟲 (小有名氣)
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2樓2010-05-26 20:35:32
ljsh
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3樓2010-05-26 20:52:13
jiahaitao1016
金蟲 (小有名氣)
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4樓2010-05-26 22:00:07
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