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hehuan_lov銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】淀粉水解實驗 已有4人參與
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前兩天做鏈霉菌的淀粉水解實驗，加了碘液后發(fā)現(xiàn)有的菌菌落周圍沒有透明圈，都是藍色的，可今天一看，那些沒有透明圈的菌周圍變成白色了，這是怎么回事？是這些菌能夠水解淀粉呢?還是碘液揮發(fā)了？請有經(jīng)驗的人指點。 是不是能在淀粉培養(yǎng)基上長的菌都能分解淀粉，即可以產(chǎn)生淀粉酶呢？ |
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dhd997
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2樓2010-06-02 11:28:08
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3樓2010-06-02 15:39:18
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scelab(金幣+7):熱心蟲友，歡迎多來交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-02 22:30:24
scelab(金幣+7):熱心蟲友，歡迎多來交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-02 22:30:24
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這種現(xiàn)象我遇到過，剛?cè)旧臅r候沒有降解圈，等過夜了就有了。我認為是淀粉酶造成的，因為碘和淀粉反應(yīng)是非常靈敏的，極少有可能出錯。隨著培養(yǎng)基不同，顏色消退的速度也不同，比如LB培養(yǎng)基碘染后顏色極快消退，但是我現(xiàn)在用的培養(yǎng)基即使放三天也不消退，這是培養(yǎng)基組分不同。看樓主的樣子應(yīng)該不是培養(yǎng)基組分的原因。 當然，淀粉酶屬于誘導(dǎo)酶，但即使是誘導(dǎo)酶也是可以有少量表達的，這個不用懷疑，屬于所謂的本底表達，只是說有淀粉誘導(dǎo)之后更容易表達而已。當然了，能在淀粉平板上生長的微生物不一定會表達淀粉酶，因為平板里還可能有別的營養(yǎng)物質(zhì)，比如說我使用的培養(yǎng)基就有胰蛋白胨。但是可以確定的是產(chǎn)生降解圈就肯定是有淀粉酶表達，因為碘染的靈敏度非常高。 樓主剛開始碘染時沒有降解圈，放置一段時間后又有了降解圈，但是沒有說是不是整塊平板都變白了。如果是整塊變白就是培養(yǎng)基組分的問題，不利于碘染絡(luò)合物存在。如果是只在菌落周圍出現(xiàn)降解圈，我認為可能是微生物產(chǎn)淀粉酶種類問題。眾所周之，淀粉酶不止一種，淀粉和碘的絡(luò)合物隨著分子鏈長度不同顏色也不同，每種淀粉酶的降解效果是不同的，酶的性質(zhì)不同，加上微生物在平板上表達淀粉酶受很多因素影響，造成菌落周圍淀粉降解物不同，絡(luò)合物的顏色也不同，加上即使是碘染后，淀粉酶還是可以繼續(xù)作用的，所以造成碘染效果比較隱晦，出現(xiàn)比較明顯的效果需要時間積累。 不用懷疑，有圈就是有酶。不過值得注意的是，固體跟液體培養(yǎng)方式不同，產(chǎn)酶狀況也有可能不同，圈大的微生物液體培養(yǎng)酶活力不一定高。 |
4樓2010-06-02 20:03:18
冼亮淀粉酶
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5樓2010-06-02 20:06:32
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6樓2010-06-11 11:06:09
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