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hehuan_lov銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】淀粉水解實驗 已有4人參與
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前兩天做鏈霉菌的淀粉水解實驗,加了碘液后發(fā)現有的菌菌落周圍沒有透明圈,都是藍色的,可今天一看,那些沒有透明圈的菌周圍變成白色了,這是怎么回事?是這些菌能夠水解淀粉呢?還是碘液揮發(fā)了?請有經驗的人指點。 是不是能在淀粉培養(yǎng)基上長的菌都能分解淀粉,即可以產生淀粉酶呢? |
榮譽版主 (文壇精英)
自由人,我型我秀!

金蟲 (正式寫手)

專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經驗: +248 |
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這種現象我遇到過,剛染色的時候沒有降解圈,等過夜了就有了。我認為是淀粉酶造成的,因為碘和淀粉反應是非常靈敏的,極少有可能出錯。隨著培養(yǎng)基不同,顏色消退的速度也不同,比如LB培養(yǎng)基碘染后顏色極快消退,但是我現在用的培養(yǎng)基即使放三天也不消退,這是培養(yǎng)基組分不同。看樓主的樣子應該不是培養(yǎng)基組分的原因。 當然,淀粉酶屬于誘導酶,但即使是誘導酶也是可以有少量表達的,這個不用懷疑,屬于所謂的本底表達,只是說有淀粉誘導之后更容易表達而已。當然了,能在淀粉平板上生長的微生物不一定會表達淀粉酶,因為平板里還可能有別的營養(yǎng)物質,比如說我使用的培養(yǎng)基就有胰蛋白胨。但是可以確定的是產生降解圈就肯定是有淀粉酶表達,因為碘染的靈敏度非常高。 樓主剛開始碘染時沒有降解圈,放置一段時間后又有了降解圈,但是沒有說是不是整塊平板都變白了。如果是整塊變白就是培養(yǎng)基組分的問題,不利于碘染絡合物存在。如果是只在菌落周圍出現降解圈,我認為可能是微生物產淀粉酶種類問題。眾所周之,淀粉酶不止一種,淀粉和碘的絡合物隨著分子鏈長度不同顏色也不同,每種淀粉酶的降解效果是不同的,酶的性質不同,加上微生物在平板上表達淀粉酶受很多因素影響,造成菌落周圍淀粉降解物不同,絡合物的顏色也不同,加上即使是碘染后,淀粉酶還是可以繼續(xù)作用的,所以造成碘染效果比較隱晦,出現比較明顯的效果需要時間積累。 不用懷疑,有圈就是有酶。不過值得注意的是,固體跟液體培養(yǎng)方式不同,產酶狀況也有可能不同,圈大的微生物液體培養(yǎng)酶活力不一定高。 |

專家顧問 (知名作家)
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新蟲 (初入文壇)
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