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狄林銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】AFLP的產(chǎn)物片段大 已有4人參與
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最近做AFLP的預(yù)擴(kuò)產(chǎn)物在200-2000bp,選擴(kuò)產(chǎn)物從200到2000以上均有拖帶,在大板上是顏色比較深的拖帶,沒有明顯條帶.以前同一連接產(chǎn)物預(yù)擴(kuò)產(chǎn)物在100-1500bp,選擴(kuò)產(chǎn)物從200到750. 做過如下嘗試:換了內(nèi)切酶,引物,接頭,連接酶;mg離子減小到0.8;將酶用量加大一倍,時間延長到14h;預(yù)擴(kuò)退火溫度提高到58度;延伸時間都從2分減到1分;可選擴(kuò)產(chǎn)物片段還是在2000左右. 敬請高手指點.謝謝! |
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lansha8331
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5樓2010-06-18 13:06:15
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