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superyuanjia至尊木蟲(chóng) (著名寫手)
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[交流]
【求助/交流】雙酶切連接不上的問(wèn)題！謝謝！ 已有4人參與
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| 我用Pst1和EcoR1雙酶切pCAM1391連接一個(gè)啟動(dòng)子序列構(gòu)建GUS載體，結(jié)果總是連接轉(zhuǎn)化篩不出2000多的啟動(dòng)子序列，一篩GUS就都有，感覺(jué)像載體自連了！但雙酶切不應(yīng)該啊。后來(lái)?yè)Q用原來(lái)已經(jīng)構(gòu)建好的1391載體切下原來(lái)連進(jìn)去的啟動(dòng)子片段，酶切跑電泳，片段和載體都是兩條帶，能明顯分開(kāi)，回收連接轉(zhuǎn)化后仍然篩不出來(lái)啟動(dòng)子序列！崩潰！請(qǐng)教一下大家！謝謝！ |
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琴瑟不鳴
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5樓2010-06-22 16:59:55
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