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YOYO1015新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助】分離分子量為3000--4000的小分子肽，用G-25凝膠分不開(kāi)，請(qǐng)大俠指教。 已有2人參與
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2樓2010-08-09 11:02:14
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對(duì)于凝膠過(guò)濾來(lái)說(shuō)，許多因素影響最終的分離效果：上樣體積、上樣體積與柱床體積比、柱子的直徑、顆粒大小、顆粒大小分布、裝填密度、孔徑大小、流速以及樣品的粘稠度等。 1、理論上說(shuō)，分子篩能上樣至柱床體積30%。但為了實(shí)現(xiàn)精確分離一般保持上樣體積與柱床體積比為0.5%-4%。在一定范圍內(nèi)，上樣體積越小分離效果越好。 2、凝膠顆粒越小，溶質(zhì)擴(kuò)散越快，從而峰形顯得細(xì)而尖銳。反之，顆粒越大，擴(kuò)散越慢，峰變得寬而平。 3、柱子細(xì)而高可以提高分離度。一般來(lái)說(shuō)，柱子提高一倍，分離效果提升40%。 4、流速越小，分離效果越好。因?yàn)榇蠓肿訌耐馑w積直接通過(guò)，小分子進(jìn)入填料空隙內(nèi)，流速越小，壓力越小，小分子在空隙內(nèi)速度越慢，跟大分子越容易分開(kāi)。 5、樣品最好濃縮，以提高純化效率。 建議：使用顆粒細(xì)小的G25填料，如果有多根可以串聯(lián)起來(lái)以增加柱床高度，適當(dāng)降低流速 |
3樓2010-08-09 15:59:04
YOYO1015
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