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cheo163金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】小鼠單抗做WB的問題
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我現(xiàn)在手上有一個需要鑒定的小鼠單抗,但是查資料顯示這種蛋白只在鼠腦中表達,表達大小為25kd。但問題是我如果用鼠腦的組織樣轉膜做western,顯色時鼠腦中的IgG輕重鏈也一起顯示(大概55kd/25kd),就沒辦法確定我的鼠抗是不是陽性,不知道該怎么解決?![]() [ Last edited by cheo163 on 2010-9-3 at 16:30 ] |
金蟲 (小有名氣)
金蟲 (正式寫手)

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我的印象是,不是所有的IgG能夠通過血腦屏障。就像胎盤屏障一樣。 所以你說的自身抗體是否能夠進入鼠腦我有些懷疑。如果按照你說的他能夠進入的話,是有可能在WB檢測的時候檢測到三條帶。即H和L chain和目的帶。那你可以用鼠腦直接WB,加二抗能夠顯色說明他分泌抗體。然后如果想分開可以用未標記的羊抗鼠二抗和你理解后的組織作用,離心,然后電泳看是否能夠雜出一條帶。 希望對你有幫助,也樂于與你討論。 good luck |

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