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小雨莎莎木蟲 (正式寫手)
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[求助]
請教WB方面的一些小細節(jié)問題 已有2人參與
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| 請教各位高手，做WB時，濾紙的厚度會對轉膜的效率有影響么？因為前兩天做WB，用的是Bio-rad的配套的厚濾紙，濕法轉膜，10%的膠，蛋白140KD，100V恒壓，1h左右，用的是Femantas的大分子量到300KD的預染marker，70KD和100KD的marker是很清晰的，但是后來臨時換了whatman的薄濾紙，同樣還是左右各三層濾紙，相同的轉膜條件，但是marker就不見了，膠上也沒有，請問是因為濾紙薄所以容易轉過么？還是別的什么原因？今天重復了一次，左右兩邊放四層濾紙，勉強能看到一點點marker，但是封閉幾小時之后幾乎就看不到了，很是郁悶，請問如何解決呢？轉膜緩沖液是常用的那種２０％甲醇的，含有ＳＤＳ的那種。謝謝啦！ |
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