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cheo163金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】小鼠單抗做WB的問題
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我現(xiàn)在手上有一個需要鑒定的小鼠單抗，但是查資料顯示這種蛋白只在鼠腦中表達(dá)，表達(dá)大小為25kd。但問題是我如果用鼠腦的組織樣轉(zhuǎn)膜做western，顯色時鼠腦中的IgG輕重鏈也一起顯示（大概55kd/25kd），就沒辦法確定我的鼠抗是不是陽性，不知道該怎么解決？ [ Last edited by cheo163 on 2010-9-3 at 16:30 ] |
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cheo163
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dianaofyezi
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4樓2010-09-03 20:40:47
dianaofyezi
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cheo163(金幣+1):我目前正打算這么做，看看結(jié)果怎么樣吧，希望有更好的方法 2010-09-03 23:03:14
scelab(金幣+5):熱心蟲友，歡迎多來交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-03 23:13:34
cheo163(金幣+1):我目前正打算這么做，看看結(jié)果怎么樣吧，希望有更好的方法 2010-09-03 23:03:14
scelab(金幣+5):熱心蟲友，歡迎多來交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-03 23:13:34
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我的印象是，不是所有的IgG能夠通過血腦屏障。就像胎盤屏障一樣。 所以你說的自身抗體是否能夠進(jìn)入鼠腦我有些懷疑。如果按照你說的他能夠進(jìn)入的話，是有可能在WB檢測的時候檢測到三條帶。即H和L chain和目的帶。那你可以用鼠腦直接WB，加二抗能夠顯色說明他分泌抗體。然后如果想分開可以用未標(biāo)記的羊抗鼠二抗和你理解后的組織作用，離心，然后電泳看是否能夠雜出一條帶。 希望對你有幫助，也樂于與你討論。 good luck |
6樓2010-09-03 22:45:41
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