 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2602 | 回復(fù): 26 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
cgt713銀蟲(chóng) (小有名氣)
|
[交流]
【專(zhuān)題】蛋白新純化思路探討 已有14人參與
|
||
|
蛋白新純化思路探討 思路：得到需要純化的樣品中所有雜蛋白的抗體，將這些抗體結(jié)合到NHS-活化的Sepharose Fast Flow上，然后再將需要純化的樣品過(guò)這個(gè)柱子，所有雜蛋白都結(jié)合在柱子上，目的蛋白穿透出來(lái)。 具體例子：原核表達(dá)蛋白純化 1. 無(wú)目的基因的PET28a-BL21，菌體超聲破碎后離心分上清和沉淀，將上清拿去免疫兔子，得到針對(duì)雜蛋白的抗體，將抗體結(jié)合到NHS-活化的Sepharose Fast Flow上，命名這根柱子為X。PET28a-目的蛋白1-BL21誘導(dǎo)表達(dá)后，菌體超聲破碎后離心分上清和沉淀，將上清過(guò)X柱，所有雜蛋白跟相應(yīng)抗體結(jié)合，目的蛋白1穿透出來(lái)，實(shí)現(xiàn)純化。 2. 無(wú)目的基因的PET28a-BL21，菌體超聲破碎后離心分上清和沉淀，將沉淀拿去免疫兔子，得到針對(duì)雜蛋白的抗體，將抗體結(jié)合到NHS-活化的Sepharose Fast Flow上，命名這根柱子為Y。PET28a-目的蛋白2-BL21誘導(dǎo)表達(dá)后，菌體超聲破碎后離心分上清和沉淀，沉淀用尿素溶解，復(fù)性后過(guò)Y柱，所有雜蛋白跟相應(yīng)抗體結(jié)合，目的蛋白2穿透出來(lái)，實(shí)現(xiàn)純化。 問(wèn)題肯定會(huì)有很多，我們課題組想嘗試這樣做一些，請(qǐng)大家給點(diǎn)建議，有哪些需要注意的地方，謝謝。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有117人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- AMPK蛋白純化問(wèn)題討論
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 請(qǐng)幫忙推薦下蛋白電泳裝置， 或?yàn)Ⅻc(diǎn)蛋白純化 or PAGE 經(jīng)驗(yàn)��！
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 如何進(jìn)一步純化這個(gè)蛋白？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- his標(biāo)簽蛋白純化，不掛柱
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 關(guān)于蛋白分離純化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路�。。。。。�！急急急
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于his-tagged 蛋白純化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】求助 小分子量蛋白多肽純化
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化問(wèn)題！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助】植物蛋白質(zhì)提取純化方法
已經(jīng)有12人回復(fù)
冼亮淀粉酶
專(zhuān)家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +248 - MolEPI: 46
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19474.4
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6590
- 在線: 2778小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 856414
- 注冊(cè): 2009-09-25
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
20樓2010-09-19 02:01:20
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 cgt713 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 286分 材料求調(diào)劑 +4 | 麻辣魷魚(yú) 2026-03-27 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +5 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 315分求調(diào)劑 +6 | 26考研上岸版26 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
[考研] 一志愿211院校 344分 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)學(xué)碩，求調(diào)劑 +5 | 丶風(fēng)雪夜歸人丶 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +6 | 墨墨漠 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專(zhuān)業(yè)總分300求調(diào)劑 +7 | 曼111 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | 江辭666 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +3 | Amber00 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 總分293求調(diào)劑 +6 | 加一一九 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩0703總分337求調(diào)劑 +7 | niko- 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854AI CV方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚(yú)567 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專(zhuān)業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 李李不服輸 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話(huà) 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 十三加油 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +6 | CX 330 2026-03-21 | 6/300 |
|