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wxmwqr金蟲 (小有名氣)
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小知識:LC/MS 中的基質效應(matrix effect)
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1 基質(matrix) 尚無統(tǒng)一的解釋,曾稱為“一種分析物(analyte)的環(huán)境(milieu)”,即指標本中除分析物以外的一切組成。以血清膽固醇(Chol)測定而言,就是指Chol以外血清中的一切成分及其物理、化學性質。 2.基質效應(matrix effect) 按NCCLS文件的定義,指 (1)標本中除分析物以外的其他成分對分析物測定值的影響。 (2)基質對分析方法準確測定分析物的能力的干擾。廣義說來,基質效應也應包括已知的干擾物(如Chol測定中膽紅素、血紅蛋白、抗壞血酸等都是干擾物),但目前只將基質效應限于生物材料中未知或未定性的物質或因素(如粘度、pH等)的影響。 .基質偏差(matrix bias) 基質效應所致分析結果的偏差稱為基質偏差。 用作校準物質或質控物的經過處理的混合血清,由于血清基質的理化性質在處理過程中的改變,在常規(guī)測定上往往出現(xiàn)基質偏差。 基質偏差的出現(xiàn)也與分析系統(tǒng)(包括方法、試劑及所用儀器設備)有關,所以有人將基質效應定性為方法、材料與基質的特異性反應。 4.制備物(processed material) 用于血脂常規(guī)測定的校準液(calibrator)及用于技能對比試驗(proficiency test,PT)或室間質量評價(EQA)的樣品(如質控血清)。 以Chol測定為例,全酶法測Chol始于1974年,在此以前用化學反應測Chol時,除了一些已知的干擾因素外尚未提及基質效應問題。1979年才由Cooper指出Chol酶法中校準液與病人血清的反應性不同,可使Chol測定值偏低5%~7%。 1994年CAP調查570實驗室時用了參考方法定值的新鮮冰凍血清為調查材料,15個同方法測定chol組中仍有11個組出現(xiàn)基質偏差,同時用制備物的4個組中,3個有基質偏差。 有的報告指出TG、HDL-C常規(guī)方法與CDC的參考方法比較,有明顯偏差,甚至>10%。McNamura等發(fā)現(xiàn)血清冰凍可在免疫法(用apoAI與E抗體分離LDL)直接測定LDL-C時出現(xiàn)明顯基質效應,血清冰凍保存2~26周后,LDL-C測定值平均偏低10%左右。 由于新鮮血清與凍干血清的apoAI測定值一致,顯示凍干對apoAI測定不產生基質效應,故apoAI參考血清以凍干形式提供。但凍干對apoB有極明顯的影響,在不同原理的免疫法中,基質偏差高達-26%~+4%,但這種變化也包括apoB分子本身的結構變化在內。所以apoB參考血清是液態(tài)冰凍保存的。 5。減少基質效應的方法 : Naito等(1993年)提出過減少基質效應的研究方向,至今仍有參考價值:改進室間質評樣品,使其作用更像新鮮人血清。 改進儀器設計及試劑組成。 選擇方法及方法學參數,使其適應性更強,且容易掌握,對制備物(校準物、室間質評樣品與質控物)基質的確切性質不敏感。 瞬間離子基體效應 moment ion matrix effect 離子的有效淌度受到周圍離子的影響,由其周圍離子所形成的包圍圈,稱為離子基體。如果樣品組分從進樣點到探測點遷移過程中,在某一時間間隔遇上一個不同組成的基體區(qū)帶,這個離子基體區(qū)帶就將對樣品組分產生影響,使它們的淌度發(fā)生瞬時變化,從而選擇性地影響溶質的遷移和分離,這就是瞬時離子基體效應。 |
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