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wxmwqr金蟲 (小有名氣)
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小知識:LC/MS 中的基質(zhì)效應(yīng)(matrix effect)
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1 基質(zhì)(matrix) 尚無統(tǒng)一的解釋,曾稱為“一種分析物(analyte)的環(huán)境(milieu)”,即指標(biāo)本中除分析物以外的一切組成。以血清膽固醇(Chol)測定而言,就是指Chol以外血清中的一切成分及其物理、化學(xué)性質(zhì)。 2.基質(zhì)效應(yīng)(matrix effect) 按NCCLS文件的定義,指 (1)標(biāo)本中除分析物以外的其他成分對分析物測定值的影響。 (2)基質(zhì)對分析方法準(zhǔn)確測定分析物的能力的干擾。廣義說來,基質(zhì)效應(yīng)也應(yīng)包括已知的干擾物(如Chol測定中膽紅素、血紅蛋白、抗壞血酸等都是干擾物),但目前只將基質(zhì)效應(yīng)限于生物材料中未知或未定性的物質(zhì)或因素(如粘度、pH等)的影響。 .基質(zhì)偏差(matrix bias) 基質(zhì)效應(yīng)所致分析結(jié)果的偏差稱為基質(zhì)偏差。 用作校準(zhǔn)物質(zhì)或質(zhì)控物的經(jīng)過處理的混合血清,由于血清基質(zhì)的理化性質(zhì)在處理過程中的改變,在常規(guī)測定上往往出現(xiàn)基質(zhì)偏差。 基質(zhì)偏差的出現(xiàn)也與分析系統(tǒng)(包括方法、試劑及所用儀器設(shè)備)有關(guān),所以有人將基質(zhì)效應(yīng)定性為方法、材料與基質(zhì)的特異性反應(yīng)。 4.制備物(processed material) 用于血脂常規(guī)測定的校準(zhǔn)液(calibrator)及用于技能對比試驗(yàn)(proficiency test,PT)或室間質(zhì)量評價(jià)(EQA)的樣品(如質(zhì)控血清)。 以Chol測定為例,全酶法測Chol始于1974年,在此以前用化學(xué)反應(yīng)測Chol時(shí),除了一些已知的干擾因素外尚未提及基質(zhì)效應(yīng)問題。1979年才由Cooper指出Chol酶法中校準(zhǔn)液與病人血清的反應(yīng)性不同,可使Chol測定值偏低5%~7%。 1994年CAP調(diào)查570實(shí)驗(yàn)室時(shí)用了參考方法定值的新鮮冰凍血清為調(diào)查材料,15個(gè)同方法測定chol組中仍有11個(gè)組出現(xiàn)基質(zhì)偏差,同時(shí)用制備物的4個(gè)組中,3個(gè)有基質(zhì)偏差。 有的報(bào)告指出TG、HDL-C常規(guī)方法與CDC的參考方法比較,有明顯偏差,甚至>10%。McNamura等發(fā)現(xiàn)血清冰凍可在免疫法(用apoAI與E抗體分離LDL)直接測定LDL-C時(shí)出現(xiàn)明顯基質(zhì)效應(yīng),血清冰凍保存2~26周后,LDL-C測定值平均偏低10%左右。 由于新鮮血清與凍干血清的apoAI測定值一致,顯示凍干對apoAI測定不產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng),故apoAI參考血清以凍干形式提供。但凍干對apoB有極明顯的影響,在不同原理的免疫法中,基質(zhì)偏差高達(dá)-26%~+4%,但這種變化也包括apoB分子本身的結(jié)構(gòu)變化在內(nèi)。所以apoB參考血清是液態(tài)冰凍保存的。 5。減少基質(zhì)效應(yīng)的方法 : Naito等(1993年)提出過減少基質(zhì)效應(yīng)的研究方向,至今仍有參考價(jià)值:改進(jìn)室間質(zhì)評樣品,使其作用更像新鮮人血清。 改進(jìn)儀器設(shè)計(jì)及試劑組成。 選擇方法及方法學(xué)參數(shù),使其適應(yīng)性更強(qiáng),且容易掌握,對制備物(校準(zhǔn)物、室間質(zhì)評樣品與質(zhì)控物)基質(zhì)的確切性質(zhì)不敏感。 瞬間離子基體效應(yīng) moment ion matrix effect 離子的有效淌度受到周圍離子的影響,由其周圍離子所形成的包圍圈,稱為離子基體。如果樣品組分從進(jìn)樣點(diǎn)到探測點(diǎn)遷移過程中,在某一時(shí)間間隔遇上一個(gè)不同組成的基體區(qū)帶,這個(gè)離子基體區(qū)帶就將對樣品組分產(chǎn)生影響,使它們的淌度發(fā)生瞬時(shí)變化,從而選擇性地影響溶質(zhì)的遷移和分離,這就是瞬時(shí)離子基體效應(yīng)。 |
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