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lianyi1989金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】3'RACE求助
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| 最近在做兩條基因的RACE，一條已經(jīng)搞定，另外一條5'也已經(jīng)出來(lái)了，但是3'卻一直卡著，卡了一個(gè)月了~這個(gè)3'已經(jīng)出條帶了，但是測(cè)序總不對(duì)，有polyA和UPM，但是找不到上游引物，和原來(lái)的序列也拼接不上，重做了兩次，測(cè)序結(jié)果都是這樣...然后就重新設(shè)計(jì)引物，已經(jīng)5條了，但是就是彌散，連條帶都沒(méi)有了~ cDNA應(yīng)該是沒(méi)問(wèn)題的，因?yàn)榱硗庖粭l基因都出結(jié)果了，用的clontech的smarter的盒子，程序和體系都是按說(shuō)明說(shuō)上推薦來(lái)的，也應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題，現(xiàn)在真不知道是哪有問(wèn)題，請(qǐng)各位蟲(chóng)友們給給意見(jiàn)，急死了~另外，我這3'真是做不出來(lái)的話(huà)，有沒(méi)有別方法可以得到全長(zhǎng)？我的基因全長(zhǎng)是1600bp左右，現(xiàn)在已經(jīng)得到了1200多了，就差3'那邊的300—400bp的了。謝謝大家啦~ |
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lianyi1989
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4樓2010-10-05 10:29:57
lhwei1987
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2樓2010-10-04 21:45:43
大白菜123789
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5樓2010-10-05 15:39:22
booew
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6樓2010-10-05 16:09:02
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