 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2174 | 回復(fù): 2 | |||
bioinfuture鐵蟲 (小有名氣)
|
[交流]
【專題】小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液制備問題 已有1人參與
|
|
弟想要做小鼠脾淋巴細(xì)胞的CD3/4/8染色，現(xiàn)在在制備脾淋巴細(xì)胞遇到瓶頸 上流式機，遇到的問題是，F(xiàn)SC/SSC象限圖，找不到的淋巴細(xì)胞群，死細(xì)胞特別多，中性粒細(xì)胞的位置也不正確。 我制備脾淋巴細(xì)胞是這樣的： 取出小鼠脾 在雙層200目濾網(wǎng)上反復(fù)研磨，得到小鼠脾細(xì)胞懸液（10ml，1640配） 1300rpm，6min（個別情況下，有些細(xì)胞未離到管底，附著在側(cè)壁上，我用的是水平轉(zhuǎn)子） 棄去上清，用1ml PBS懸起（這時，會有一團白色絮狀物，有的大，有的小，用1ml槍頭反復(fù)吹，吹不散，但是如果堵在槍口，可以帶出來，我通常是吸出來，棄掉） 然后加ACK裂解液（自己配的，NH4CL，150mM）4ml 室溫裂解5min 加1640至10ml，立刻離心 棄掉上清，用1ml 1640懸起（如果我上步的絮狀物沒去處干凈的話，懸起還有絮狀物，如果去除干凈就沒有了），補液體至10ml 離心 ....... 不知道，為什么每次上機，淋巴細(xì)胞群總是找的不是十分理想，要么找到淋巴細(xì)胞群，但是位置不是十分正確，和中性粒細(xì)胞群相差很遠(yuǎn)。要么干脆找不到淋巴細(xì)胞群。不知是研磨得方法不對？還是ACK紅細(xì)胞裂解液使用不對？ 試驗在即，小弟萬分著急，望大蝦幫助我解決之。 本文來自: 小木蟲論壇 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2478741 本文來自: 小木蟲論壇 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2479197 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有57人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 急��！T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 帶有綠木霉的菌懸液如何進行酵母細(xì)胞計數(shù)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 分離外周血淋巴細(xì)胞時可以用PBS代替Hanks液嗎
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 淋巴細(xì)胞分離
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 淋巴細(xì)胞增殖實驗（MTT法）中的幾個問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】淋巴細(xì)胞 傳代問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)胞懸液的細(xì)胞體積分?jǐn)?shù)的測定
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助：淋巴細(xì)胞分離液收集白細(xì)胞后離心
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】怎樣才能使貼壁細(xì)胞的細(xì)胞懸液能夠高活性的保存長時間呢？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于MTT檢測淋巴細(xì)胞活性的若干問題，請教各位大俠~~
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 誰能告訴我怎樣在血液的淋巴細(xì)胞中提RNA
已經(jīng)有8人回復(fù)
maxiaohu
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2239.1
- 帖子: 1541
- 在線: 221.9小時
- 蟲號: 307870
- 注冊: 2006-12-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 臨床獸醫(yī)學(xué)
2樓2010-10-19 09:52:31
michellefree
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 332.3
- 紅花: 1
- 帖子: 77
- 在線: 25小時
- 蟲號: 1429951
- 注冊: 2011-10-07
- 專業(yè): 精神分裂癥和其他精神障礙
3樓2012-09-08 11:19:10
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 bioinfuture 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +7 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 考研292求調(diào)劑 +3 | YIXIAO789 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化求調(diào)劑 +3 | Jsman 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +6 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +3 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩0703總分337求調(diào)劑 +7 | niko- 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料專碩 335 分求調(diào)劑 +4 | 拒絕冷暴力 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑(一志愿湖南大學(xué)070300) +5 | 番茄頭--- 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 315分，誠求調(diào)劑，材料與化工085600 +3 | 13756423260 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 26研0 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩301分求調(diào)劑 +7 | Liyouyumairs 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|