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apple6299鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助/交流】為何定量PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)不規(guī)則 已有6人參與
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| 各位兄弟姐妹，Taq-Man法檢測(cè)我的目的基因，內(nèi)參擴(kuò)增曲線(xiàn)正常，但是目的基因擴(kuò)增曲線(xiàn)不光滑，是什么原因�。� |
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apple6299
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2樓2010-10-16 17:17:16
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dhd997(金幣+2):謝謝交流。 2010-10-17 09:59:29
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1.加樣不準(zhǔn)確 2。氣泡作祟 3，你這是一個(gè)模板的重復(fù)？還是不同模板你沒(méi)做重復(fù)，只是預(yù)實(shí)驗(yàn) 建議 1，換成好的槍頭和八連管，建議AXYGEN 2，多做重復(fù)，最少五個(gè)，保證準(zhǔn)確性，也可以修正的余地 3，混合分裝一定要均勻，這是非常非常重要的，特別是模板！�。。� 4，八連管的擺放位置，和你設(shè)計(jì)的程序一定要吻合 |
4樓2010-10-17 09:07:49
apple6299
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5樓2010-10-17 12:32:53
apple6299
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是兩步法，先提RNA反轉(zhuǎn)成cDNA之后，才用我的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增的！因?yàn)樗矔r(shí)離心后，確保反應(yīng)液全部在毛細(xì)管下部，可以排除毛細(xì)管有氣泡的因素 本文來(lái)自: 小木蟲(chóng)論壇 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2496005 |
6樓2010-10-17 12:34:00
apple6299
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7樓2010-10-17 12:39:36
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