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[交流]
【求助/交流】關(guān)于Tn5構(gòu)建突變體的問題 已有2人參與
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| 我用的供體為攜帶pUTmini—Tn5 Km2質(zhì)粒的大腸桿菌S17一kpir,受體為痢疾桿菌2457T2a,革蘭氏陰性菌,供體和受體菌分別搖管培養(yǎng)后按體積比2:1在無抗平板培養(yǎng),而后將長出的菌苔刮下稀釋,涂布雙抗平板即Cm和Kan抗性,且我做了10-1到10-4幾個(gè)稀釋度。問題是總會(huì)長出大小菌,并且密密麻麻的,因?yàn)槲倚枰罅康耐蛔凅w做篩選,所以會(huì)影響后續(xù)點(diǎn)板,求高手指導(dǎo)一下,謝謝! |
木蟲 (正式寫手)
銅蟲 (小有名氣)
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