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[交流]
【討論】LC-MS/MS的問題 很多人都能碰到
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本人剛做LC-MS/MS 有幾個(gè)問題想和大家討論一下，我所用的是 三重四級(jí)桿，定量牛就不用了。 關(guān)于總離子流圖的 問題，想咨詢下大家， 問題（1）我感覺似乎總離子流圖沒什么多大的用處，主不過是用來找到母離子罷了，TIC峰型的好壞 對(duì)定量有影響嗎？感覺經(jīng)過MS1 2的SIM 別的離子也不會(huì)造成多大的影響吧，可能會(huì)有些MATRIX EFFECT。 必須調(diào)整條件得到峰型比較好的TIC嗎？ （2) 我想 同時(shí)測(cè)定個(gè) 物質(zhì)A和B，A的是 極性大的 流動(dòng)相為C ; D 20:80 B是極性小的 流動(dòng)相為C ： D 80:20 我怎么 來選擇一個(gè)合適的流動(dòng)相比例從而更好的定量呢，這似乎有和第一個(gè)問題相關(guān)，如果 TIC沒什么用的話 流動(dòng)相選擇偏中間的比例 如C ：D 50;50 ，利用MS的 SIM 功能，即使LC 分開的不是很好，對(duì)定量也沒有什么太大的影響。 不知道這樣做行不行，有前輩 高人指點(diǎn)一下嗎。 這個(gè)問題相信困擾著很多人 ，重賞 謝謝 |
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碰到過和樓主類似的問題 uv下峰相應(yīng)很大，但將同樣的方法嫁接到ms上，在tic上就沒有圖。 首先，在uv上我們加酸或者堿，以及離子對(duì)試劑，是為了保證待分離組分在色譜柱中盡可能以游離態(tài)存在，而保證較好的峰形或者較好的分離度。 其次在質(zhì)譜中，調(diào)酸或者調(diào)堿，是為了保證待測(cè)組分在離子源中具有好的離子化效果。 結(jié)合以上兩種分析，在uv上分離和檢測(cè)相應(yīng)很好的組分，往往在ms上看不到，或者只有微弱的tic響應(yīng)，原因在于待測(cè)化合物在色譜中主要以游離態(tài)存在，進(jìn)行離子化過程中，其離子化效率受到了抑制。 對(duì)于該問題怎么來解決呢 首先，在不接色譜柱的情況下，通過兩通直接進(jìn)樣，去摸索待測(cè)組分的最佳離子化條件。比對(duì)該離子化條件與色譜中調(diào)酸調(diào)堿中的區(qū)別，如果差別比較大，最后進(jìn)行柱后離子化條件衍生過程。實(shí)驗(yàn)看看效果如何。 其次，接上色譜柱，進(jìn)樣品看色譜分離和ms檢測(cè)，又沒有改善，如果沒有改善，該考慮ms的離子源是否干凈，已經(jīng)毛細(xì)管是否需要進(jìn)行清洗，如果有改善，在需要對(duì)上述優(yōu)化的條件進(jìn)行微調(diào)，知道得到最佳的分離條件以及最佳的ms結(jié)果為止。 很多蟲蟲都認(rèn)為色譜方法可以直接移植到ms上，其實(shí)存在這樣的誤區(qū)。 希望對(duì)你有幫助 |
17樓2013-05-10 09:09:01
3樓2010-11-22 20:58:27
4樓2010-11-22 22:12:28
5樓2010-11-23 16:16:02
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