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janny22092金蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】紫外分光測吸光度不穩(wěn)定 已有5人參與
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蜜的脫色實驗,在測定其吸光度的時候,變數(shù)較大。不同的時間測出來的吸光度數(shù)據(jù)不一樣,不知道是什么因素影響的。 還有一個問題,就是空白實驗做對比的時候,是用原始的稀釋倍數(shù)相同的糖蜜呢,還是不加脫色劑而其他的處理步驟都要走一遍之后所得到的糖蜜。 注:糖蜜本身靜置一段時間會出現(xiàn)沉淀,離心也會有沉淀,還有,不加脫色劑只是在一定條件下離心后 其吸光度也會變化很多,只是沒有加脫色劑之后的明顯而已 [ Last edited by lovibond on 2011-11-27 at 19:59 ] |
木蟲 (正式寫手)
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首先,紫外分光光度法測數(shù)據(jù)本身就很不穩(wěn)定,受影響比較大。 其次,蜜的脫色程度決定了里面所含影響物質(zhì)的多少,色素的影響肯定明顯的,所以你說不同的時間測出來的數(shù)據(jù)不同,那是必然的,就是相同時間所測數(shù)據(jù)也應(yīng)有波動,因為脫色的方式肯定對其也有影響,充分脫色與未充分脫色對紫外分光比色也是有影響的。 再有就是你說的空白比對,我不明白是什么意思。 |
金蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
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我認(rèn)為你應(yīng)該稀釋,離心過濾之后做空白參比 因為離心過濾是物理因素的影響,并不是脫色劑的影響,既然你是比較脫色效果的 所以其它的物理影響因素應(yīng)該一致 因為你自己也說糖蜜本身就會沉淀的,你脫色之后的樣品離心沉淀并不是脫色劑處理的效果啊,是物理因素迫使其澄清的,所以我建議你用相同處理的糖蜜做空白,只是不要加脫色劑就好了。 你認(rèn)為呢? 這個你可以在你的實驗論文中寫明條件的,即使答辯老師問起來,你也能明確回答他們。 呵呵,希望能對你有所幫助。 |
木蟲 (著名寫手)
濁世俗人癡事妄言
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空白應(yīng)按6樓所述去做,因為所謂空白試驗指在不加供試品處理的情況下,按同法操作所得的結(jié)果,這樣才能盡量排除操作過程對試驗效果的影響。 影響紫外吸收的因素: 吸光度值小數(shù)點后第三位一般允許正負(fù)5個數(shù)的偏差,但不同規(guī)格、檔次的儀器穩(wěn)定性不同,可以把參比池和檢測池都放空白液,看吸光度值隨時間的變化,至少記錄半天,每半小時記錄一次,學(xué)校一般都是進口設(shè)備,可能比較穩(wěn)定; 大部分種類的“顏色”是一種容易損失的成分,受氧直接影響而出現(xiàn)損失,并且一般都隨光照和升溫加速; 與時間也成正相關(guān),你把它常溫、常壓、光照放半月以上,不用離心和加脫色劑,它也就變淺甚至無色了; 如你所說,蜜沉淀過程就是一個受時間影響的脫色過程,吸光度隨時間不同,當(dāng)然會不同,問題你都發(fā)現(xiàn)了,可能主要需要聯(lián)系起來。 如果算上儀器誤差,你的脫色劑好像不怎么起作用,坦白的說。 |

金蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (正式寫手)
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