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janny22092金蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】紫外分光測吸光度不穩(wěn)定 已有5人參與
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蜜的脫色實驗，在測定其吸光度的時候，變數較大。不同的時間測出來的吸光度數據不一樣，不知道是什么因素影響的。 還有一個問題，就是空白實驗做對比的時候，是用原始的稀釋倍數相同的糖蜜呢，還是不加脫色劑而其他的處理步驟都要走一遍之后所得到的糖蜜。 注：糖蜜本身靜置一段時間會出現(xiàn)沉淀，離心也會有沉淀，還有，不加脫色劑只是在一定條件下離心后 其吸光度也會變化很多，只是沒有加脫色劑之后的明顯而已 [ Last edited by lovibond on 2011-11-27 at 19:59 ] |
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首先，紫外分光光度法測數據本身就很不穩(wěn)定，受影響比較大。 其次，蜜的脫色程度決定了里面所含影響物質的多少，色素的影響肯定明顯的，所以你說不同的時間測出來的數據不同，那是必然的，就是相同時間所測數據也應有波動，因為脫色的方式肯定對其也有影響，充分脫色與未充分脫色對紫外分光比色也是有影響的。 再有就是你說的空白比對，我不明白是什么意思。 |
a4799679582樓2010-11-25 16:55:43
janny22092
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3樓2010-11-26 08:30:48
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4樓2010-11-26 08:37:52
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5樓2010-11-26 09:50:24
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我認為你應該稀釋，離心過濾之后做空白參比 因為離心過濾是物理因素的影響，并不是脫色劑的影響，既然你是比較脫色效果的 所以其它的物理影響因素應該一致 因為你自己也說糖蜜本身就會沉淀的，你脫色之后的樣品離心沉淀并不是脫色劑處理的效果啊，是物理因素迫使其澄清的，所以我建議你用相同處理的糖蜜做空白，只是不要加脫色劑就好了。 你認為呢？ 這個你可以在你的實驗論文中寫明條件的，即使答辯老師問起來，你也能明確回答他們。 呵呵，希望能對你有所幫助。 |
6樓2010-11-26 10:20:10
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空白應按6樓所述去做，因為所謂空白試驗指在不加供試品處理的情況下,按同法操作所得的結果，這樣才能盡量排除操作過程對試驗效果的影響。 影響紫外吸收的因素： 吸光度值小數點后第三位一般允許正負5個數的偏差，但不同規(guī)格、檔次的儀器穩(wěn)定性不同，可以把參比池和檢測池都放空白液，看吸光度值隨時間的變化，至少記錄半天，每半小時記錄一次，學校一般都是進口設備，可能比較穩(wěn)定； 大部分種類的“顏色”是一種容易損失的成分，受氧直接影響而出現(xiàn)損失，并且一般都隨光照和升溫加速； 與時間也成正相關，你把它常溫、常壓、光照放半月以上，不用離心和加脫色劑，它也就變淺甚至無色了； 如你所說，蜜沉淀過程就是一個受時間影響的脫色過程，吸光度隨時間不同，當然會不同，問題你都發(fā)現(xiàn)了，可能主要需要聯(lián)系起來。 如果算上儀器誤差，你的脫色劑好像不怎么起作用，坦白的說。  |
7樓2010-11-26 11:29:40
janny22092
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