版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

返回列表

2009103158

新蟲 (著名寫手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 1794
帖子: 1184
在線: 153.7小時(shí)
蟲號(hào): 985077

[交流] 【求助/交流】southern雜交求助！

本人正在做植物基因組的southern雜交以確定外源基因的拷貝數(shù)，用的是ROCHE的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I。今天出了結(jié)果，十分郁悶，只有marker和陽(yáng)性對(duì)照顯色了，樣品沒(méi)有顏色。請(qǐng)看附圖，跪求高人相助�。�！

上圖為提取的基因組DNA，以Hind111為marker

上圖為酶切基因組后取出的5ul樣跑膠看基因組是否被酶切完全，酶切體系為100ul

上圖為轉(zhuǎn)膜結(jié)束后檢驗(yàn)轉(zhuǎn)磨是否完全，殘留的片段是較大的片段

上圖為剛剛出來(lái)的結(jié)果，只有DNA marker和陽(yáng)性對(duì)照顯色，樣品沒(méi)有一個(gè)顯色的
忙碌了一星期，卻沒(méi)有得到結(jié)果，十分郁悶，請(qǐng)經(jīng)驗(yàn)人士給予幫助�。。�

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇” 已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有143人回復(fù)
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

southern雜交--以含有探針的質(zhì)粒雜交，為什么能雜出兩條帶。已經(jīng)有9人回復(fù)
southern blot 內(nèi)切酶和探針設(shè)計(jì) 已經(jīng)有6人回復(fù)
southern blot 確定基因拷貝數(shù)原理是什么？已經(jīng)有4人回復(fù)
植物southern雜交已經(jīng)有19人回復(fù)
DNA雜交過(guò)程中，Tris的作用？已經(jīng)有6人回復(fù)
關(guān)于northern southern一些問(wèn)題已經(jīng)有3人回復(fù)
Southern 雜交（Southern Blotting）已經(jīng)有5人回復(fù)
southern blot實(shí)驗(yàn)求助已經(jīng)有10人回復(fù)
斑馬魚胚胎整體原位雜交問(wèn)題求助！已經(jīng)有7人回復(fù)
southern雜交問(wèn)題已經(jīng)有12人回復(fù)
DNA雜交條件？？？已經(jīng)有5人回復(fù)
northern雜交和southern雜交的區(qū)別已經(jīng)有11人回復(fù)
southern雜交檢測(cè)基因拷貝數(shù)的原理是什么？已經(jīng)有19人回復(fù)
【求助/交流】關(guān)于southern雜交非特異性雜交的問(wèn)題已經(jīng)有8人回復(fù)
【求助/交流】羅氏southern試劑盒顯色問(wèn)題已經(jīng)有5人回復(fù)
【求助/交流】western雜交已經(jīng)有16人回復(fù)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2010-11-28 15:42:42

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

gyesang

榮譽(yù)版主 (著名寫手)

2009103158(金幣+1): 2011-02-11 20:13:00

從你的酶切產(chǎn)物跑膠結(jié)果來(lái)看，你的基因組DNA降解了，因?yàn)槟愕臈l帶不是上面亮下邊暗，就是正好相反，高質(zhì)量的基因組DNA酶切出來(lái)跑膠后是均勻的一片
1

好的酶切，電泳效果應(yīng)該是這樣，其中主要取決于DNA質(zhì)量的好壞

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

2樓2010-11-28 17:07:14

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

馬馬和虎虎

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 170.4
帖子: 70
在線: 11.5小時(shí)
蟲號(hào): 1474260

★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

請(qǐng)問(wèn)，Marker為什么可以顯色��？

贊一下(4人)

回復(fù)此樓

6樓2011-12-27 18:44:33

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

Sureking

新蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 3.3
帖子: 6
在線: 5.9小時(shí)
蟲號(hào): 1141280

★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

2樓: Originally posted by gyesang at 2010-11-28 17:07:14:
從你的酶切產(chǎn)物跑膠結(jié)果來(lái)看，你的基因組DNA降解了，因?yàn)槟愕臈l帶不是上面亮下邊暗，就是正好相反，高質(zhì)量的基因組DNA酶切出來(lái)跑膠后是均勻的一片
1

[img]http://pic.www.gaoyang168.com/201011/28/849017_170602.jpg[ ...

下面亮的應(yīng)該是沒(méi)有除去的rna吧

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

3樓2011-11-19 20:59:36

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

mascotte

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 10 (幼兒園)
金幣: 1998.9
帖子: 328
在線: 193.4小時(shí)
蟲號(hào): 492008

★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-12-27 17:30:49

沒(méi)做過(guò)生物素標(biāo)記的探針，只做過(guò)同位素標(biāo)記的，同位素標(biāo)記探針的敏感度大大高于生物素；
探針長(zhǎng)度不夠的話雜交的效果也不好，我一般用長(zhǎng)度大于500bp的探針；
探針的類型不一樣的話（DNA or RNA），雜交的溫度也有區(qū)別；
膜的選擇應(yīng)該符合樣品和探針的類型；
最后，雜交液中的硫酸葡聚糖能夠提高信號(hào)強(qiáng)度，但是太多了背景會(huì)臟。

Good Luck！

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

4樓2011-11-19 22:26:00

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

baiyongqin

新蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 51.3
帖子: 45
在線: 7.9小時(shí)
蟲號(hào): 1553354

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+6): 鼓勵(lì)交流！Good！ 2011-12-27 17:31:18
西瓜(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-12-27 17:38:54

內(nèi)容已刪除

回復(fù)此樓

5樓2011-12-27 16:50:10

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

刁寒冰

銀蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 3606.7
帖子: 101
在線: 72.5小時(shí)
蟲號(hào): 1280616

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

請(qǐng)問(wèn)樓主，試劑盒在哪買的呢？我實(shí)驗(yàn)室之前都沒(méi)人做過(guò)這個(gè)，有點(diǎn)感覺(jué)無(wú)所適從!
試劑盒有好幾種吧？怎么選擇自己需要的呢？

贊一下

回復(fù)此樓

7樓2012-06-04 21:32:10

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

happygjx

木蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2476
帖子: 124
在線: 37.5小時(shí)
蟲號(hào): 1278692

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

1967307樓: Originally posted by 刁寒冰 at 2012-06-04 21:32:10
請(qǐng)問(wèn)樓主，試劑盒在哪買的呢？我實(shí)驗(yàn)室之前都沒(méi)人做過(guò)這個(gè)，有點(diǎn)感覺(jué)無(wú)所適從!
試劑盒有好幾種吧？怎么選擇自己需要的呢？

一般都用GE的試劑盒（國(guó)藥）打8折后RMB5000左右

贊一下

回復(fù)此樓

8樓2012-07-21 10:16:08

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

刁寒冰

銀蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 3606.7
帖子: 101
在線: 72.5小時(shí)
蟲號(hào): 1280616

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

1947597樓: Originally posted by baiyongqin at 2011-12-27 16:50:10
我也遇到過(guò)很多次的同樣情況，很明顯，你的DNA降解很嚴(yán)重，而且有嚴(yán)重的DNA污染。因?yàn)槟愕年?yáng)性對(duì)照很清晰，背景也很清楚，說(shuō)明probe是沒(méi)問(wèn)題的，只是DNA 出問(wèn)題了。建議改善DNA 的質(zhì)量，祝好運(yùn)！可以給你參考一下我 ...

請(qǐng)問(wèn)marker怎么會(huì)顯色呢？很奇怪

贊一下

回復(fù)此樓

9樓2012-09-14 13:00:28

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

刁寒冰

銀蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 3606.7
帖子: 101
在線: 72.5小時(shí)
蟲號(hào): 1280616

引用回帖:

349008樓: Originally posted by 2009103158 at 2010-11-28 15:42:42
本人正在做植物基因組的southern雜交以確定外源基因的拷貝數(shù)，用的是ROCHE的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I。今天出了結(jié)果，十分郁悶，只有marker和陽(yáng)性對(duì)照顯色了，樣品沒(méi)有顏色。請(qǐng)看附 ...

請(qǐng)問(wèn)樓主，DNA marker怎么會(huì)顯色呢？

贊一下

回復(fù)此樓

10樓2012-09-14 13:01:34

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

yuliangju2

新蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 16.5
帖子: 54
在線: 23.9小時(shí)
蟲號(hào): 1423798

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

1977478樓: Originally posted by 刁寒冰 at 2012-09-14 13:01:34
請(qǐng)問(wèn)樓主，DNA marker怎么會(huì)顯色呢？...

因?yàn)閙arker也是dig標(biāo)記過(guò)的

贊一下

回復(fù)此樓

11樓2013-03-28 09:41:48

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

電泳王子

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 118.6
帖子: 43
在線: 9.8小時(shí)
蟲號(hào): 1726926

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

5樓: Originally posted by baiyongqin at 2011-12-27 16:50:10
我也遇到過(guò)很多次的同樣情況，很明顯，你的DNA降解很嚴(yán)重，而且有嚴(yán)重的DNA污染。因?yàn)槟愕年?yáng)性對(duì)照很清晰，背景也很清楚，說(shuō)明probe是沒(méi)問(wèn)題的，只是DNA 出問(wèn)題了。建議改善DNA 的質(zhì)量，祝好運(yùn)！可以給你參考一下我 ...

請(qǐng)問(wèn)marker怎么標(biāo)記的呢？DNA的量是多少？探針濃度和洗脫時(shí)間控制在多少呢？

贊一下

回復(fù)此樓

12樓2013-11-05 09:23:36

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

cutewm

銅蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 197.7
帖子: 73
在線: 39.4小時(shí)
蟲號(hào): 2303821

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

你好，我有個(gè)實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)在需要做這個(gè)southern blot我做了很久做不出來(lái)，一直在摸索條件，請(qǐng)問(wèn)你有木有方法，可以讓我們參考一下，因?yàn)槲矣X(jué)得你做的很棒。我們也可以資源共享別的，如果你需要的話，我們正好也有，我是南開(kāi)生科院內(nèi)質(zhì)網(wǎng)課題組。謝謝

贊一下

回復(fù)此樓

13樓2015-10-26 17:01:36

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主 2009103158 的主題更新

返回列表

普通表情龍兔虎貓高級(jí)回復(fù) (可上傳附件)

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5	沐析汀汀 2026-03-21	5/250	2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 328求調(diào)劑 +4	LHHL66 2026-03-23	4/200	2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 333求調(diào)劑 +6	87639 2026-03-21	10/500	2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 352求調(diào)劑 +3	大米飯！ 2026-03-22	3/150	2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 310求調(diào)劑 +4	baibai1314 2026-03-16	4/200	2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5	困困困困坤坤 2026-03-20	6/300	2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 求調(diào)劑 +5	Zhangbod 2026-03-21	7/350	2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 384求調(diào)劑 +3	子系博 2026-03-22	4/200	2026-03-22 11:04 by 搏擊518
[考研] 280求調(diào)劑 +11	咕嚕曉曉 2026-03-18	12/600	2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 0805 316求調(diào)劑 +3	大雪深藏 2026-03-18	3/150	2026-03-21 18:55 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3	收到VS 2026-03-21	3/150	2026-03-21 18:42 by 學(xué)員8dgXkO
[考研] 268求調(diào)劑 +9	簡(jiǎn)單點(diǎn)0 2026-03-17	9/450	2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 346求調(diào)劑[0856] +4	WayneLim327 2026-03-16	7/350	2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 296求調(diào)劑 +6	www_q 2026-03-18	10/500	2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 329求調(diào)劑 +9	想上學(xué)吖吖 2026-03-19	9/450	2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西南交通專碩材料355 本科雙非求調(diào)劑 +5	西南交通專材355 2026-03-19	5/250	2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中國(guó)海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5	1孫悟空 2026-03-17	6/300	2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑招人�。。� +3	山海天嵐 2026-03-17	4/200	2026-03-19 21:34 by 怎么釋懷
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3	2026eternal 2026-03-18	3/150	2026-03-18 19:09 by 搏擊518
[考博] 26博士申請(qǐng) +3	1042136743 2026-03-17	3/150	2026-03-17 23:30 by 輕松不少隨

24小時(shí)熱門版塊排行榜

[交流] 【求助/交流】southern雜交求助！

» 猜你喜歡

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

» 搶金幣啦！回帖就可以得到: 查看全部散金貼

[交流] 【求助/交流】southern雜交求助！

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼