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ytficfuu木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】關于southern雜交非特異性雜交的問題 已有3人參與
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各位大蝦，小弟近日正在做southern雜交，主要是看基因組中一個基因的拷貝數(shù)。大致流程如下：基因組酶切過夜--電泳（40V，3h)--真空轉膜(5ih,1.5h)--紫外交聯(lián)（1.2kj/cm,240s)--采用羅氏試劑盒標記顯影。探針標記用的是隨機引物標記法。 但是每次曝光出來的結果，經(jīng)酶切后的樣品經(jīng)標記顯色后，幾乎全部都雜交上了，跟酶切后跑電泳看到的效果差不多，探針與陰性對照并不雜交。請各位大蝦多多指教！ |
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shaquila
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