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ytficfuu木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】關(guān)于southern雜交非特異性雜交的問題 已有3人參與
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各位大蝦,小弟近日正在做southern雜交,主要是看基因組中一個基因的拷貝數(shù)。大致流程如下:基因組酶切過夜--電泳(40V,3h)--真空轉(zhuǎn)膜(5ih,1.5h)--紫外交聯(lián)(1.2kj/cm,240s)--采用羅氏試劑盒標記顯影。探針標記用的是隨機引物標記法。 但是每次曝光出來的結(jié)果,經(jīng)酶切后的樣品經(jīng)標記顯色后,幾乎全部都雜交上了,跟酶切后跑電泳看到的效果差不多,探針與陰性對照并不雜交。請各位大蝦多多指教! |
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