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紫竹風(fēng)

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[交流] 【求助/交流】瓊脂糖凝膠電泳的詛咒

最近做瓊脂糖凝膠電泳，樣品膠孔跑著跑著就破了（拔梳子時(shí)是完好的，膠也凝的很好，緩沖液也沒(méi)問(wèn)題），但Marker孔跑的條帶卻很清晰，膠孔也沒(méi)破，結(jié)果就是UV下，Marker孔條帶清晰，樣品孔啥都沒(méi)有（肯定是漏掉了）。。。前幾個(gè)星期開(kāi)始就開(kāi)始這種受詛咒的命運(yùn)了，這周一竟然奇跡般的沒(méi)破，但從昨天起又開(kāi)始了，為啥？這到底是為啥呢？大家?guī)蛶臀野桑x謝啦

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1樓 2010-12-17 15:40:15

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susizheng

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紫竹風(fēng)(金幣+1):謝謝參與

看了半天沒(méi)搞明白。
不知道是不是樣品沒(méi)條帶，懷疑膠的點(diǎn)樣孔破了的意思。
點(diǎn)樣孔破沒(méi)破，樣品上樣時(shí)，不是與loading buffer混合過(guò)嘛，漏不漏從槽子正面不可以看得很清楚嘛。

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2樓2010-12-17 16:07:33

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brightfuture01

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呵呵，是不是用的不配套的梳子和模具��？可以考慮將梳子下端用砂紙或者什么粗糙的東西磨掉一點(diǎn)，這樣點(diǎn)樣孔下端就厚實(shí)一點(diǎn)，拔梳子就不會(huì)破掉了。

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3樓2010-12-17 16:11:44

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feng__

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引用回帖:

Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-17 16:11:44:
呵呵，是不是用的不配套的梳子和模具��？可以考慮將梳子下端用砂紙或者什么粗糙的東西磨掉一點(diǎn)，這樣點(diǎn)樣孔下端就厚實(shí)一點(diǎn)，拔梳子就不會(huì)破掉了。

maker沒(méi)有異常，說(shuō)明應(yīng)該不是梳子太長(zhǎng)的原因吧？

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4樓2010-12-17 16:19:31

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phoenix0

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是不是點(diǎn)樣時(shí)出的問(wèn)題？

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5樓2010-12-17 16:45:48

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brightfuture01

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amisking(金幣+2):good！ 2010-12-17 20:17:55

引用回帖:

Originally posted by feng__ at 2010-12-17 16:19:31:

maker沒(méi)有異常，說(shuō)明應(yīng)該不是梳子太長(zhǎng)的原因吧？

梳子的各個(gè)齒長(zhǎng)短不一

不過(guò)詭異的是，膠孔是跑著跑著破的，一開(kāi)始沒(méi)破？

根據(jù)我跑基因組的經(jīng)驗(yàn)，0.8%的膠，90-120V的電壓，幾分鐘DNA就會(huì)跑出膠孔進(jìn)入膠體的。

，太詭異了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-17 at 16:52 ]

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6樓2010-12-17 16:50:02

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YaYa785

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引用回帖:

Originally posted by feng__ at 2010-12-17 16:19:31:

maker沒(méi)有異常，說(shuō)明應(yīng)該不是梳子太長(zhǎng)的原因吧？

同意這個(gè)意見(jiàn)
還有就是點(diǎn)樣的時(shí)候槍頭把膠扎破了....
另外膠硬了,在拔的時(shí)候容易裂開(kāi)，有時(shí)候只有一點(diǎn)點(diǎn)縫也會(huì)漏樣的....你拔梳子的時(shí)候在膠上面加一點(diǎn)緩沖液...

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7樓2010-12-17 16:53:43

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