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feiye2214木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】BLAST之后,怎么拿全序列啊? 已有5人參與
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從頭說起,我想獲得目的物種的beta-actin基因全序列,以一些相近物種的同源序列(mRNA完整片段)設計引物,以目的物種的基因組DNA為模板,獲得了一條853bp的序列,經(jīng)BLAST之后,與人類9號染色體上的片段相似度78%,與小鼠的:Mus musculus actin, beta, cytoplasmic (Actb), mRNA Length=1891,覆蓋率96%,相似度83%; 還有一個:PREDICTED: Mus musculus similar to gamma actin-like protein (LOC667260), misc RNA Length=1313,覆蓋率96%,相似度83%,這個“similar to gamma actin-like protein ”是說什么蛋白啊? 與相近物種比對之后,有基因DNA序列的,也有mRNA序列的,覆蓋率、相似度都在百分之八九十! 為什么我用的是DNA進行擴增的,序列為什么跟mRNA同源性那么高?中間不是應該有內(nèi)含子嗎?還是850bp不夠長?都處在外顯子了?? 進一步的問題:小弟想搞到這個beta-actin基因全序列,是不是以這個獲得的850bp的序列為設計區(qū)段,設計引物向兩頭擴增?染色體步移是不是就是說這個情況?高手給點指導哈。 [ Last edited by feiye2214 on 2010-12-25 at 14:41 ] |
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