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niwopengyou木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】caco-2細胞transwell單層模型的電阻及空泡化問題 已有2人參與
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有幾個問題想向各位前輩請教: 我現(xiàn)在剛開始養(yǎng)caco-2細胞,打算做transwell實驗,養(yǎng)了21天,用HBSS洗完后測定電阻是200多,普萘洛爾的papp是10-5,正常,阿替洛爾的papp也是10-5,這就不正常了,說明細胞單層不致密。我想問下有哪些原因可能導(dǎo)致細胞長的不致密呢? 附注:1.鋪板的密度是20萬/ml;2.在transwell小池里看不到細胞形態(tài),用的是聚碳酸酯膜;3.還有一個現(xiàn)象,細胞在平時培養(yǎng)的過程中,容易出現(xiàn)空泡現(xiàn)象;4.培養(yǎng)基是用的DMEM,ATCC上都是用MEM,是不是培養(yǎng)基的問題?5.一般換液都是將培養(yǎng)基放置室溫平衡,主要是怕溫度對FBS的影響;6.我想問下這個Hank’s液對細胞有影響沒?為什么用hank's洗完細胞以后,電阻值就下降幾乎一半呢? 望各位前輩賜教!謝謝! |
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