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[交流]
【求助/交流】求助平板抑菌試驗的技術問題
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如題，最近在做一個抑菌試驗，需要驗證一種固體片狀材料的抗菌性能，由于不是粉末或者可溶物質，采用什么試驗手段成為我的一個小難題。通過文獻查閱，確定的試驗方案是： 因為是預實驗，所以采用的固體材料都是不抗菌的，想要先試試方案是否可行 方案1，將固體材料放置于平板的固體培養(yǎng)基上，滴菌液（大腸桿菌），涂開，之后再分別滴0.5%瓊脂的半固體培養(yǎng)基，0.25%瓊脂的半固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基； 方案2，預先制備厚度約3mm的瓊脂培養(yǎng)基。將固體材料消毒之后平放在培養(yǎng)皿內(nèi)，滴菌液，涂開，之后從預先制備的瓊脂培養(yǎng)基薄層切開適當大小，蓋在菌液上；（之所以這樣是因為如果是固體培養(yǎng)基滴在菌液上，培養(yǎng)基太粘稠，而且極易凝固） 以上兩種方案之后，將培養(yǎng)皿（蓋子在上面，非倒放）37度培養(yǎng)12-16小時。 結果第二天一看，按照方案一培養(yǎng)的，材料上看不到明顯的菌斑，而材料周圍的固體培養(yǎng)基上卻有大量菌斑。仔細想來，應該是因為蓋子在上，水分冷凝后可能滴到了材料上，沖散了滴液體培養(yǎng)基的菌液。但材料上半固體培養(yǎng)基里面為什么不長細菌呢，是時間不夠長嗎？ 方案二，預先做好的瓊脂培養(yǎng)基薄層，做了不同菌液濃度的，發(fā)現(xiàn)小濃度的有依稀的菌落生成，但是大濃度（10~5和10~7）卻沒有菌落和菌斑，實在是搞不懂。 啰嗦這么多，想要請有經(jīng)驗的蟲子們教教我，我這抑菌試驗到底該怎么做啊~~~~頭大。。。。 （文獻上講，滴瓊脂培養(yǎng)基時候，要點是溫度，不能太高，否則細菌會燙死，也不能太低，要不就凝固了，這些我也都考慮到了，實在是。。。。不知道該怎么辦） |
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