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kaobo2012木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【討論】在測(cè)效價(jià)時(shí)，所用封閉蛋白的問(wèn)題 已有1人參與
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免疫動(dòng)物后，在測(cè)動(dòng)物效價(jià)時(shí)，所用的是ELISA實(shí)驗(yàn)，用的封閉蛋白，最好是小牛血清，但因?yàn)閮r(jià)格原因，一般都用脫脂奶粉，也有用干酪素的。奶粉易溶些，干酪素不易溶。這兩種我都用過(guò)。 脫脂奶粉的濃度是5%，而干酪素是1%，而且，從價(jià)格上，干酪素更實(shí)惠些。 我想問(wèn)下，在此用脫脂奶粉與干酪素還有其他區(qū)別嗎？為什么有的實(shí)驗(yàn)室用脫脂奶粉，而有的用干酪素呢？請(qǐng)名位高人發(fā)表見解！ |
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木蟲 (正式寫手)
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
kaobo2012: 回帖置頂 2012-01-09 23:20:00
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kaobo2012: 回帖置頂 2012-01-09 23:20:00
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干酪素需要加入NAOH煮沸才能夠溶解，而BSA也有本身的缺陷，可以用上海生工的以下產(chǎn)品 無(wú)蛋白封閉液 產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 在常規(guī)的Western blot 和ELISA實(shí)驗(yàn)中，需要用封閉試劑將膜或酶標(biāo)板孔中的未被抗原或抗體占據(jù)的位點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)行封閉，通常的封閉試劑有BSA，脫脂奶粉等，但是BSA中有少量的抗體殘留，導(dǎo)致抗原/抗體之間的交叉反應(yīng)，產(chǎn)生高背景，雜帶較多或使得本底水平增高，同樣脫脂奶粉中含有少量的生物素和堿性磷酸酶殘留，在使用生物素-親和素系統(tǒng)和堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗時(shí)，也會(huì)使得高背景或本底水平增高，本產(chǎn)品采用化學(xué)合成的高分子聚合物，作為封閉試劑，從而避免了BSA，脫脂奶粉作為封閉試劑的缺陷，使得實(shí)驗(yàn)的結(jié)果更加精確，膜上的條帶更加清晰，同時(shí)也不降低免疫印跡反應(yīng)的靈敏度。 產(chǎn)品組成： PW040 2% 封閉試劑 500ML 180元 PW041 1% 封閉試劑in1XPBS 500ml 120元 PW042 1%封閉試劑in 1XTBS 500ml 120元 |
2樓2011-03-12 18:13:39
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