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baby1_9253344

金蟲 (小有名氣)

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[交流] 【求助/交流】做酵母的蟲蟲們幫忙看一下~

需要按照文獻(xiàn)培養(yǎng)帶有某種質(zhì)粒的釀酒酵母（S. cerevisiae），讓它表達(dá)出特定蛋白，這時(shí)候用的培養(yǎng)基和普通YPD不一樣，如原文描述：

"...studies were cultured in URA+ selective dextrose (SD)
medium (0.7% [w/v] Difco yeast nitrogen base, 2% [w/v] glucose, 0.005%
[w/v] adenine hemisulfate, and each of L-histidine, L-tryptophan and
L-leucine at concentration of 0.003% [w/v])."

查了《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》里面的SD培養(yǎng)基中的氮源好像是無(wú)氨基酸的，文獻(xiàn)里的酵母氮源并沒(méi)有特指without amino acid，那應(yīng)該是什么樣的呢，還有，搞不清楚什么是“URA+ selective dextrose”，URA+的意思。

還請(qǐng)各位做酵母的童鞋幫忙翻譯一下...弄清楚了好訂購(gòu)培養(yǎng)基。。。。

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1樓 2011-02-19 20:27:10

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gongeleven

鐵桿木蟲 (正式寫手)

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baby1_9253344(金幣+1): 3Q 2011-02-21 09:19:23

要知道酵母里的是什么質(zhì)粒

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3樓2011-02-20 12:30:51

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susizheng

木蟲 (著名寫手)

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rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)積極參與交流~~~ 2011-02-19 22:05:23
baby1_9253344(金幣+1): 謝謝詳細(xì)解答！ 2011-02-21 09:19:06

SD培養(yǎng)基中的氮源是一種無(wú)氨基酸的氮源，試劑公司有的賣，YNB，買的時(shí)候記得弄清楚是否已經(jīng)添加了硫酸銨。
URA+，指該實(shí)驗(yàn)中用到的釀酒酵母菌株是URA缺陷型，用SD篩選培養(yǎng)基時(shí)，需要添加URA.

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2樓2011-02-19 21:56:18

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baby1_9253344

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引用回帖:

Originally posted by gongeleven at 2011-02-20 04:30:51:
要知道酵母里的是什么質(zhì)粒

質(zhì)粒p416GPD,centromeric plasmid

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4樓2011-02-20 16:13:55

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lwenshan

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baby1_9253344(金幣+1): 多謝~可惜剛才上Invitrogen官網(wǎng)，打不開，不曉得怎么下載相關(guān)資料了。。。 2011-02-21 09:20:08
dhd997(金幣+2): 熱心鼓勵(lì) 2011-02-21 09:26:32

按照你給的參考文獻(xiàn)，你的菌株可能是ura-，his-，try-，leu-的菌株，你的載體可能有URA選擇標(biāo)記，那么培養(yǎng)基中的YNB肯定是無(wú)氨基酸的，但是為啥沒(méi)寫加入ura的量呢？釀酒酵母相關(guān)知識(shí)你可以下載Invitrogen的釀酒酵母表達(dá)載體相關(guān)資料

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5樓2011-02-20 20:09:29

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