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【求助】進空白時的干擾峰影響
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各位做液相色譜的大哥大姐們,請問這種情況你們遇到過嗎? 流動相A:2g的Na2HPO4溶于1000ml純化水中,用85%的磷酸調(diào)PH值至2.2。 流動相B:甲醇 溶劑:(50:50/甲醇:乙腈):流動相A=20:80 用的梯度洗脫 Time(min) 流動相A 流動相B 0 80 20 5 80 20 18 60 40 37 60 40 38 80 20 45 80 20 目前出現(xiàn)的情況是: (1)在主峰出峰的位置,溶劑峰有個鼓包,影響主峰的檢測。 所采取的措施: (1)配流動相A時,分別換Na2HPO4不同的廠家(天津凱通,北京精求),以及含結(jié)晶水的Na2HPO4;且加熱Na2HPO4溶液;以及純化水分別用公司里的純化水及娃哈哈水。溶劑仍有鼓包。 (2)不進溶劑,直接走空針。在主峰位置仍有鼓包。 (3)由于懷疑是針上的樣品殘留,便換了六通閥及進樣針,然后運行空針,發(fā)現(xiàn):主峰位置仍有鼓包,說明不是針上樣品的殘留。 (4) 分別單獨進50:50/甲醇:乙腈和流動相A,主峰位置有鼓包。 (5)不用梯度,直接用流動相A:流動相B=80:20進空針,主峰位置無鼓包。 直接用流動相A:流動相B=60:40進空針,主峰位置無鼓包。 這個方法是國外客戶給的,看他們的圖譜沒發(fā)現(xiàn)有這個問題,但我們通過不同的機子,不同的人,以及在公司里面不同的實驗室,都有鼓包出現(xiàn)的問題,做了這些感覺像是流動相在走梯度時,由于流動相混合所產(chǎn)生的,但也不能完全就能得出結(jié)論。 各位大俠們能不能幫幫忙呀,多出出主意,或者是在做時是否也遇到過這種問題?謝謝了。 |
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