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【求助】進(jìn)空白時(shí)的干擾峰影響
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各位做液相色譜的大哥大姐們，請(qǐng)問這種情況你們遇到過嗎？ 流動(dòng)相A:2g的Na2HPO4溶于1000ml純化水中，用85%的磷酸調(diào)PH值至2.2。 流動(dòng)相B：甲醇 溶劑：（50:50/甲醇：乙腈):流動(dòng)相A=20:80 用的梯度洗脫 Time（min） 流動(dòng)相A 流動(dòng)相B 0 80 20 5 80 20 18 60 40 37 60 40 38 80 20 45 80 20 目前出現(xiàn)的情況是： （1）在主峰出峰的位置，溶劑峰有個(gè)鼓包，影響主峰的檢測(cè)。 所采取的措施： （1）配流動(dòng)相A時(shí)，分別換Na2HPO4不同的廠家（天津凱通，北京精求），以及含結(jié)晶水的Na2HPO4；且加熱Na2HPO4溶液；以及純化水分別用公司里的純化水及娃哈哈水。溶劑仍有鼓包。 （2）不進(jìn)溶劑，直接走空針。在主峰位置仍有鼓包。 （3）由于懷疑是針上的樣品殘留，便換了六通閥及進(jìn)樣針，然后運(yùn)行空針，發(fā)現(xiàn)：主峰位置仍有鼓包，說明不是針上樣品的殘留。 （4) 分別單獨(dú)進(jìn)50:50/甲醇：乙腈和流動(dòng)相A，主峰位置有鼓包。 （5）不用梯度，直接用流動(dòng)相A：流動(dòng)相B=80:20進(jìn)空針，主峰位置無鼓包。 直接用流動(dòng)相A：流動(dòng)相B=60:40進(jìn)空針，主峰位置無鼓包。 這個(gè)方法是國(guó)外客戶給的，看他們的圖譜沒發(fā)現(xiàn)有這個(gè)問題，但我們通過不同的機(jī)子，不同的人，以及在公司里面不同的實(shí)驗(yàn)室，都有鼓包出現(xiàn)的問題，做了這些感覺像是流動(dòng)相在走梯度時(shí)，由于流動(dòng)相混合所產(chǎn)生的，但也不能完全就能得出結(jié)論。 各位大俠們能不能幫幫忙呀，多出出主意，或者是在做時(shí)是否也遇到過這種問題？謝謝了。 |
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癡夷子皮
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2樓2011-02-21 16:33:25
3樓2011-02-22 07:55:52
4樓2011-02-22 08:18:08
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