版塊導航: 正在加載中...

登錄注冊

應《網(wǎng)絡安全法》要求，自2017年10月1日起，未進行實名認證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進行手機號驗證，感謝您的理解與支持！

24小時熱門版塊排行榜

返回列表

孤島浪客

至尊木蟲 (著名寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 15895.1
帖子: 1283
在線: 124.8小時
蟲號: 857633

[交流] 【求助/交流】抗微管藥物的體外篩選問題

請教各位前輩，我正在做兩個化合物的抗腫瘤藥理研究，細胞增殖抑制上做出效果較好，但在細胞周期上沒有做出結果，正在尋找其靶點，想在微管方面做一下，看它們有沒有在微管方面有作用，目前查到的資料很少，具體歸結為兩類，一類是通過細胞免疫熒光拍照，一種是體外的模型篩選。

1.對于細胞免疫熒光方面，想求助一下詳細的步驟和注意點，并想請高手指點一下對于腫瘤細胞株的選擇有沒要求，是不是細胞核大一點的更利于拍出比較好的照片。

2.對于體外模型的篩選，想尋求一下具體步驟和要點，查到的資料都是自己提取的微管蛋白，有的是在比色皿中測，有的是用96孔板測，但實驗室沒有提取的條件，不知道有沒有試劑盒，包括純的微管蛋白和緩沖液等，麻煩大家附上具體實驗所需的主要儀器。

謝謝大家能抽空解答，不甚感激！

回復此樓

» 猜你喜歡

不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍” 已經(jīng)有0人回復
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇” 已經(jīng)有0人回復
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費? 已經(jīng)有77人回復
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體已經(jīng)有0人回復
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京已經(jīng)有0人回復

» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:

急求 G418篩選相關問題已經(jīng)有4人回復
親們，有誰知道有篩選抑菌藥物的地方嗎？已經(jīng)有2人回復
藍白斑篩選的問題已經(jīng)有5人回復
BPS醫(yī)藥系統(tǒng)（一款藥物靶點篩選、科研課題設計平臺系統(tǒng)）已經(jīng)有4人回復
藍白斑篩選出現(xiàn)的問題已經(jīng)有11人回復
【討論】藥物篩選新技術探討已經(jīng)有9人回復
【求助】抗腫瘤藥物的篩選方法或注意事項已經(jīng)有12人回復
【求助/交流】藥物篩選，化合物稀釋問題！已經(jīng)有9人回復
【求助/交流】求助：利用干細胞做心臟疾病藥物篩選要用哪些設備？已經(jīng)有7人回復

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2011-03-02 10:40:39

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

★
1949stone(金幣+1): 鼓勵 2011-03-02 15:17:38

1、增殖上有效果？直接的實驗證據(jù)是什么？
2、為什么想到細胞骨架？觀察到細胞的形態(tài)和運動能力改變了嗎？

贊一下(1人)

回復此樓

2樓2011-03-02 11:27:15

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

孤島浪客

至尊木蟲 (著名寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 15895.1
帖子: 1283
在線: 124.8小時
蟲號: 857633

引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 11:27:15:
1、增殖上有效果？直接的實驗證據(jù)是什么？
2、為什么想到細胞骨架？觀察到細胞的形態(tài)和運動能力改變了嗎？

MTT和SRB兩個細胞篩選上面都有結果，細胞周期和TOP酶抑制也都做了，沒有明顯結果，所以想到細胞骨架，Hoechst染色觀察結果細胞形態(tài)在很低劑量的情況下就該改變了，之后想針對微管找靶點的，你有相關的信息嗎？可以指點一下嗎？

贊一下

回復此樓

3樓2011-03-02 12:49:06

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

★ ★
1949stone(金幣+2): 繼續(xù)鼓勵 2011-03-02 15:17:59

1、MTT和SRB都不是增殖的直接證據(jù)。最直接的證據(jù)是Brd-U
2、Hoechst只是染核型，核型變，比如固縮著色變亮，那是凋亡，不直接反映細胞骨架的問題

因此，你應該去研究凋亡

贊一下(1人)

回復此樓

4樓2011-03-02 14:35:54

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

孤島浪客

至尊木蟲 (著名寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 15895.1
帖子: 1283
在線: 124.8小時
蟲號: 857633

引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 14:35:54:
1、MTT和SRB都不是增殖的直接證據(jù)。最直接的證據(jù)是Brd-U
2、Hoechst只是染核型，核型變，比如固縮著色變亮，那是凋亡，不直接反映細胞骨架的問題

因此，你應該去研究凋亡

凋亡已經(jīng)做過，是有影響的，但老師說這是結果，不是機制，還是得找這個藥物的靶點，所以才想去微管方面尋找，嘗試一下是否是這個靶點。能否告訴我一下你的QQ或是手機號，感覺你是這方面的專家，想多向請教你一下。我的QQ是476617248.郵箱是bo_ting@126.com. 多謝！

贊一下

回復此樓

5樓2011-03-02 16:39:05

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

★ ★
lstt09nk(金幣+2): 樓主的第一句~~很符合論壇的宗旨~~ 2011-03-02 18:44:51

引用回帖:

Originally posted by 孤島浪客 at 2011-03-02 16:39:05:
凋亡已經(jīng)做過，是有影響的，但老師說這是結果，不是機制，還是得找這個藥物的靶點，所以才想去微管方面尋找，嘗試一下是否是這個靶點。能否告訴我一下你的QQ或是手機號，感覺你是這方面的專家，想多向請教你一下 ...

呃……本人不接受私下解答……不好意思……還是發(fā)帖公開討論比較好吧

凋亡機制方面我貌似以前都說過很多了
首先你應該去看，這個藥物引起細胞哪個通路依賴性的凋亡（線粒體通路、死亡受體通路？）
測一下caspase-8和9的活性就知道是依賴于哪個通路或者有cross-talk

解決了這個問題再進一步討論吧

贊一下(1人)

回復此樓

6樓2011-03-02 17:14:15

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

★ ★
lstt09nk(金幣+2): 鼓勵~~ 2011-03-02 18:45:09
孤島浪客(金幣+20): 2011-03-03 10:40:42

如果你要確診確實是凋亡，光有hoechst一個證據(jù)是不夠的
包括我剛才說的cas活性測定（要測個cas-3）在內
還得做個Annexin V/PI看看
多方面證據(jù)才能支撐凋亡

還要做LDH，看細胞都飄起來的時候LDH釋放有沒有很劇烈地增加，如果增加好多了，可能是凋亡和細胞毒雙方面的機制

所以你要做的東西還很多很多

贊一下(1人)

回復此樓

7樓2011-03-02 17:16:37

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

孤島浪客

至尊木蟲 (著名寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 15895.1
帖子: 1283
在線: 124.8小時
蟲號: 857633

引用回帖:

沒事兒，呵呵，我凋亡在A/V上做出有趨勢，Cas-3有趨勢，現(xiàn)在在做Bax、bcl-2，這個會繼續(xù)做，但是凋亡上面解釋最多只能說明一個通路，并不能說明這個化合物的真正的機制在哪方面，所以才想往微管方面做的，老師一直希望在微管上做，不希望在凋亡上做太深。

贊一下

回復此樓

8樓2011-03-02 18:07:33

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

孤島浪客

至尊木蟲 (著名寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 15895.1
帖子: 1283
在線: 124.8小時
蟲號: 857633

lstt09nk: 實驗上的疑問，歡迎您來木蟲生物版提問~~ 2011-03-02 18:46:24

引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-02 17:14:15:
呃……本人不接受私下解答……不好意思……還是發(fā)帖公開討論比較好吧

凋亡機制方面我貌似以前都說過很多了
首先你應該去看，這個藥物引起細胞哪個通路依賴性的凋亡（線粒體通路、死亡受體通路？）
測一下c ...

要是你是我導師就好了，呵呵！

贊一下(1人)

回復此樓

9樓2011-03-02 18:08:40

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

引用回帖:

Originally posted by 孤島浪客 at 2011-03-02 18:08:40:
要是你是我導師就好了，呵呵！

介個……大家平輩，相互交流吧~~

贊一下

回復此樓

10樓2011-03-02 23:00:24

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

★
rainwander(金幣+1): 鼓勵積極參與交流~~~ 2011-03-03 11:26:53

引用回帖:

Originally posted by 孤島浪客 at 2011-03-02 18:07:33:
沒事兒，呵呵，我凋亡在A/V上做出有趨勢，Cas-3有趨勢，現(xiàn)在在做Bax、bcl-2，這個會繼續(xù)做，但是凋亡上面解釋最多只能說明一個通路，并不能說明這個化合物的真正的機制在哪方面，所以才想往微管方面做的，老師一 ...

如果想研究微管
直接證據(jù)那就去做激光共聚焦，有變就是有變，沒變就是沒變~~
但是，怎么說呢，骨架瓦解和凋亡，誰是雞誰是蛋，在你這個模型中不好說
時效是得好好把握的，看誰先發(fā)生

贊一下(1人)

回復此樓

11樓2011-03-02 23:15:39

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

jiangjinhuan

金蟲 (初入文壇)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 528
帖子: 11
在線: 49.5小時
蟲號: 1358091

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

引用回帖:

5樓: Originally posted by 孤島浪客 at 2011-03-02 16:39:05:
凋亡已經(jīng)做過，是有影響的，但老師說這是結果，不是機制，還是得找這個藥物的靶點，所以才想去微管方面尋找，嘗試一下是否是這個靶點。能否告訴我一下你的QQ或是手機號，感覺你是這方面的專家，想多向請教你一下 ...

你好，請問你微管靶點方面的實驗做得怎樣了，因為我也想做這方面的研究，因為剛接觸實驗，很多不太懂，想向你請教一下。。。

贊一下(1人)

回復此樓

12樓2011-09-25 10:52:34

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

l-c-l

金蟲 (正式寫手)

MolEPI: 1
應助: 58 (初中生)
金幣: 2434.4
帖子: 773
在線: 130.8小時
蟲號: 1311363

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

偶有點疑問，細胞周期沒結果，微管實驗還需要做嗎？一般抗微管直接影響細胞周期吧。不想在凋亡通路上做太深，可以從最近比較熱的血管生成和轉移做做。

[ 發(fā)自手機版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

贊一下(1人)

回復此樓

13樓2011-09-25 23:46:33

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

shwkx1987

新蟲 (小有名氣)

應助: 1 (幼兒園)
金幣: 650.2
帖子: 73
在線: 24.9小時
蟲號: 858081

★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

你好，請問你微管靶點方面的實驗進展怎樣了。我們實驗室也準備做細胞骨架，想向你請教

贊一下

回復此樓

14樓2012-06-12 15:38:11

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關版塊跳轉我要訂閱樓主孤島浪客的主題更新

返回列表

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 293求調劑 +11	zjl的號 2026-03-16	16/800	2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 085601材料工程專碩求調劑 +5	慕寒mio 2026-03-16	5/250	2026-03-17 21:31 by hmn_wj
[考研] 296求調劑 +5	大口吃飯身體健 2026-03-13	5/250	2026-03-17 21:05 by 不惑可樂
[考研] 299求調劑 +4	△小透明* 2026-03-17	4/200	2026-03-17 20:09 by peike
[考研] 【0856】化學工程（085602）313 分，本科學科評估A類院�；瘜W工程與工藝，誠求調劑 +7	小劉快快上岸 2026-03-11	8/400	2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求調劑 +6	丶宏Sir 2026-03-13	6/300	2026-03-17 16:13 by 醉在風里
[考研] 一志愿蘇州大學材料工程（085601）專碩有科研經(jīng)歷三項國獎兩個實用型專利一項省級立項 +6	大火山小火山 2026-03-16	8/400	2026-03-17 15:05 by 無懈可擊111
[碩博家園] 深圳大學碩士招生（2026秋，傳感器方向，僅錄取第一志愿） +4	xujiaoszu 2026-03-11	9/450	2026-03-17 10:29 by xujiaoszu
[考研] 0703化學調劑 +6	妮妮ninicgb 2026-03-15	9/450	2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 085601材料工程315分求調劑 +3	yang_0104 2026-03-15	3/150	2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 289求調劑 +4	這么名字咋樣 2026-03-14	6/300	2026-03-14 18:58 by userper
[基金申請] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個專家，不知道名字 +3	zk200107 2026-03-12	6/300	2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 0703，333分求調劑一志愿鄭州大學-物理化學 +3	李魔女斗篷 2026-03-11	3/150	2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 材料工程調劑 +9	咪咪空空 2026-03-12	9/450	2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 26調劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過A區(qū)線 +6	步川酷紫123 2026-03-13	6/300	2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 材料與化工085600調劑求老師收留 +9	jiaanl 2026-03-11	9/450	2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 材料專碩350 求調劑 +4	王金科 2026-03-12	4/200	2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 314求調劑 +7	無懈可擊的巨人 2026-03-12	7/350	2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 工科調劑 +4	Jiang191123！ 2026-03-11	4/200	2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 土木第一志愿276求調劑，科研和技能十分豐富，求新興方向的導師收留 +3	土木小天才 2026-03-12	3/150	2026-03-13 15:01 by JourneyLucky

24小時熱門版塊排行榜

[交流] 【求助/交流】抗微管藥物的體外篩選問題

» 猜你喜歡

» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:

» 搶金幣啦！回帖就可以得到: 查看全部散金貼

» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼