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sdwq木蟲 (正式寫手)
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【求助/交流】有關(guān)外切酶的一個(gè)問(wèn)題 已有3人參與
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| DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，如果3‘端修飾熒光基團(tuán)后，外切酶是否還可以起作用？ |
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2樓2011-07-21 08:00:16
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5樓2011-07-22 16:41:59
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
西瓜(金幣+5, EPI+1): 專業(yè) 2011-07-22 17:11:42
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西瓜(金幣+5, EPI+1): 專業(yè) 2011-07-22 17:11:42
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DNA鏈的擴(kuò)增都是從5‘→3′，所以現(xiàn)在做PCR用的所有的聚合酶都有5‘→3′聚合酶活性；外切酶的作用是對(duì)DNA鏈進(jìn)行突變修復(fù)，一般酶都有5′→3′外切酶活性，即這種酶可以從DNA鏈的5’端切下堿基；而具有保真性能的聚合酶才有3′→5′的外切酶活性，當(dāng)新鏈擴(kuò)增過(guò)程中，一旦發(fā)生了錯(cuò)配，在酶自身3′→5′的外切酶的作用下就會(huì)立刻把新產(chǎn)生的錯(cuò)配堿基剪切掉，然后依照模板，連上正確配對(duì)的堿基。Taq酶由于沒(méi)有3′→5′的外切酶的活性所以他擴(kuò)增的片段錯(cuò)配率比高保真的要高很多 |
6樓2011-07-22 16:57:59
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