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ydmao2009

銀蟲 (小有名氣)


[交流] 【求助/交流】MTT時(shí) 結(jié)果不重復(fù)問題

各位蟲友,F(xiàn)在我做化合物活性實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,想做抗腫瘤活性,采用MTT法,結(jié)果就出了很多問題。問題主要體現(xiàn)在 實(shí)驗(yàn)不重復(fù)。 有一次是陰性組 在0.7左右,我的化合物結(jié)果是0.2左右,抑制率大概是80%。結(jié)果第二次就不重復(fù)了。當(dāng)然第二次陰性組的讀數(shù)都是在1.2~1.7以上,而抑制率就為0,實(shí)驗(yàn)不重復(fù). 我想問的是,是不是因?yàn)殛幮越M的讀數(shù)偏大,導(dǎo)致我的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 就出現(xiàn)異常。 我下面是思路是用計(jì)數(shù)板來控制細(xì)胞濃度到10的4~5次方數(shù)量級(jí)把。請(qǐng)各位做過MTT的蟲友幫忙分析下可能的原因。謝謝了
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三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)


★ ★
ydmao2009(金幣+1):謝謝參與
rainwander(金幣+1): 鼓勵(lì)積極參與交流~~~ 2011-03-19 09:35:24
ydmao2009(金幣+2): 謝謝。我感覺是這個(gè)問題,但是沒法控制程度。不知道是4次方還是6次方細(xì)胞為好,每個(gè)人說法都不同 2011-03-19 19:28:31
細(xì)胞種太密了……
細(xì)胞多了就把殺傷力給平均分擔(dān)了,然后就耐受了,就這么簡(jiǎn)單的道理~~
2樓2011-03-18 23:55:05
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zhengfan1109

銀蟲 (正式寫手)



ydmao2009(金幣+1):謝謝參與
ydmao2009(金幣+1): thank you so much. 2011-03-19 19:29:04
Back up ATP.

The result of the second experiment is not accurate due to the high density of the cell. And it would be better to control the density of cell in a same level so that you can compare the results.
3樓2011-03-19 02:24:51
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三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)


不知道是4次方還是6次方細(xì)胞為好,每個(gè)人說法都不同

不同細(xì)胞不一樣,你控制好對(duì)照組在你檢測(cè)的時(shí)間點(diǎn)剛好長(zhǎng)滿的程度
4樓2011-03-19 23:07:30
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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)



ydmao2009(金幣+1):謝謝參與
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-19 23:07:30:
不知道是4次方還是6次方細(xì)胞為好,每個(gè)人說法都不同

不同細(xì)胞不一樣,你控制好對(duì)照組在你檢測(cè)的時(shí)間點(diǎn)剛好長(zhǎng)滿的程度

我感覺
先用不同濃度種板,用MTT測(cè)一下生長(zhǎng)曲線,用量就大概知道了,有道理嗎?
5樓2011-04-21 10:47:58
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三磷酸腺苷

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)


引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-04-21 10:47:58:
我感覺
先用不同濃度種板,用MTT測(cè)一下生長(zhǎng)曲線,用量就大概知道了,有道理嗎?

反正不要讓細(xì)胞長(zhǎng)太滿,以及每次固定細(xì)胞密度即可
6樓2011-04-21 12:11:29
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