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[交流]
【求助】有關(guān)DEAE裝柱問題
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初來咋到的我現(xiàn)在用DEAE-纖維素純化粗多糖，上玻璃柱，有關(guān)填料用量與所上樣品的量之間該怎么樣處理？ 還有這種填料裝柱前預(yù)處理和裝柱要求該怎么樣。還有怎么樣解決洗脫慢這個問題？需要做分級接收嗎？謝謝了。 |
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2樓2011-03-19 20:45:47
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
zcczj(金幣+1): 非常感謝，請問你做過這方面的嗎？想多了解下呢。 2011-05-18 23:21:10
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
zcczj(金幣+1): 非常感謝，請問你做過這方面的嗎？想多了解下呢。 2011-05-18 23:21:10
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3樓2011-05-17 10:12:10
★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
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4樓2011-05-19 20:43:54
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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（1）DE52陰離子交換劑干粉處理 先將100g的DE52陰離子交換劑干粉倒入250ml燒杯中，加入 150ml蒸餾水浸泡3h，去除雜質(zhì)；再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1－2h,再用無離子水或蒸餾水洗至pH值中性或PH4以上，并將其在抽濾漏斗中抽干；將抽干的離子交換劑浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1－2h，再用無離子水或蒸餾水將其洗至中性。 (2) DEAE－纖維素52裝柱（2cm,50cm） 將層析柱清洗干凈垂直固定到層析架上，加1/3體積的無離子水，打開下出液口，水流暢通，即刻將小燒杯中裝有的柱材，輕輕倒入層析柱中，凝膠自然慢慢沉降再層析柱底部，凝膠沉積直到離層析柱上端1.5－2cm處，停止裝柱，然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱體積（約30ml），最后用水洗淋洗至流出液pH值顯中性即可。 |
5樓2015-08-12 09:52:18
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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我也在做這個，柱子是【1，60】的，用40g纖維素。 （1）DE52陰離子交換劑干粉處理 先將30g的DE52陰離子交換劑干粉倒入250ml燒杯中，加入 150ml蒸餾水浸泡3h，去除雜質(zhì)；再在150ml的0.5M的HCL溶液中浸泡1－2h,再用無離子水或蒸餾水洗至pH值中性或PH4以上，并將其在抽濾漏斗中抽干；將抽干的離子交換劑浸泡在150ml的0.5M的NaOH溶液中1－2h，再用無離子水或蒸餾水將其洗至中性。 (2) DEAE－纖維素52裝柱（2cm,50cm） 將層析柱清洗干凈垂直固定到層析架上，加1/3體積的無離子水，打開下出液口，水流暢通，即刻將小燒杯中裝有的柱材，輕輕倒入層析柱中，凝膠自然慢慢沉降再層析柱底部，凝膠沉積直到離層析柱上端1.5－2cm處，停止裝柱，然后再用0.5M的NaOH淋洗2-3柱體積（約30ml），最后用水洗淋洗至流出液pH值顯中性即可。 |
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