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[交流] 【求助/交流】怎么測(cè)微生物的ATP,ADP,AMP

怎么測(cè)微生物的ATP,ADP,AMP？我看文獻(xiàn)說(shuō)用螢火蟲熒光素酶的生物發(fā)光反映測(cè)定，但是沒(méi)有具體步驟，請(qǐng)問(wèn)有這種試劑盒嗎？還是自己買這種酶來(lái)測(cè)？具體步驟是怎么樣的？請(qǐng)幫幫我！謝謝！

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1樓 2011-04-01 10:07:52

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沙中清泉

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同問(wèn)

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2樓2011-04-01 14:59:13

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Originally posted by 沙中清泉 at 2011-04-01 14:59:13:
同問(wèn)

誰(shuí)能幫幫我們��？

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3樓2011-04-01 15:47:51

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yancao

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sunmaocheng(金幣+5): 2011-04-25 15:19:53

用HPLC就可以，流動(dòng)相擁磷酸緩沖液，C18柱，不過(guò)要自己摸一下條件的。

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4樓2011-04-01 16:08:55

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proteinwang

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sunmaocheng(金幣+3): 2011-04-25 15:20:04

首先提取胞內(nèi)代謝物，然后用LC-MS檢測(cè)代謝物和利用標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行定性和定量分析，但是胞內(nèi)代謝物提取的過(guò)程中很容易出現(xiàn)滲漏現(xiàn)象，所以需要摸索條件。
其次，好像有類似的試劑盒，我在文獻(xiàn)中見(jiàn)過(guò)，但是名字記不起來(lái)了，不好意思。

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5樓2011-04-02 08:01:36

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Originally posted by yancao at 2011-04-01 16:08:55:
用HPLC就可以，流動(dòng)相擁磷酸緩沖液，C18柱，不過(guò)要自己摸一下條件的。

你好！你用過(guò)這種方法嗎？

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6樓2011-04-02 10:04:47

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Originally posted by proteinwang at 2011-04-02 08:01:36:
首先提取胞內(nèi)代謝物，然后用LC-MS檢測(cè)代謝物和利用標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行定性和定量分析，但是胞內(nèi)代謝物提取的過(guò)程中很容易出現(xiàn)滲漏現(xiàn)象，所以需要摸索條件。
其次，好像有類似的試劑盒，我在文獻(xiàn)中見(jiàn)過(guò)，但是名字記不起 ...

LC-ms貴嗎？我現(xiàn)在想找比較便宜的方法！

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7樓2011-04-02 10:06:10

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xiuwei001

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scelab(金幣+3): 高手，謝謝交流 2011-04-03 23:44:48

LC-ms不算貴，100塊錢一個(gè)樣吧，各地價(jià)格不等。不用ms也可以，只用adp，atp的變化來(lái)測(cè)酶活。但是這個(gè)方法不是很精確，有硬傷。

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8樓2011-04-03 17:00:43

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tidna

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rainwander(金幣+5): 鼓勵(lì)新蟲積極參與交流~~~ 2011-04-05 19:25:51
sunmaocheng(金幣+2): 2011-04-06 15:40:48

可以用Sato和Stanley的測(cè)定方法，參考一下這兩篇文獻(xiàn)吧~
Kim W S, Park J H, Tandianus J E, et al. A distinct physiological state of Lactococcus lactis cells that confers survival against a direct and prolonged exposure to severe stresses [J]. FEMS Microbiol Lett, 2002, 212(2): 203-208.
Li Y, Hugenholtz J, Abee T, et al. Glutathione protects Lactococcus lactis against oxidative stress [J]. Appl Environ Microbiol, 2003, 69(10): 5739-5745.

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9樓2011-04-05 16:35:44

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yancao

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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

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Originally posted by sunmaocheng at 2011-04-02 10:04:47:
你好！你用過(guò)這種方法嗎？

實(shí)驗(yàn)室有人做過(guò)，但我自己還沒(méi)親自做過(guò)，可能過(guò)一段時(shí)間會(huì)做，不知道能不能分的好。

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10樓2011-07-01 09:08:15

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