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yhy322鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】引物特異性PCR（SSP-PCR）檢測(cè)SNP，是不是容易出現(xiàn)雜帶呀 已有6人參與
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用引物特異性PCR檢測(cè)單點(diǎn)突變，下游引物一樣，上游引物只差一個(gè)堿基。分別在兩個(gè)體系（體系1和體系2）中進(jìn)行PCR，我覺(jué)得結(jié)果應(yīng)該是純合子只有在體系1或體系2二者之一中有條帶，雜合子兩個(gè)體系都有帶，且為同樣亮度的。 但為什么我的結(jié)果總會(huì)是在一個(gè)體系中有清晰條帶，另一體系中也有模糊條帶。是不是這種方法容易出現(xiàn)這種情況，可不可以認(rèn)為只要不是同等亮度的都可判斷為純合型？ 請(qǐng)各位大俠指教！非常感謝！ |
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3樓2011-04-08 10:30:55
★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
1949stone(金幣+4): 很可愛(ài)的回復(fù) 很有用 2011-04-08 11:14:33
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
1949stone(金幣+4): 很可愛(ài)的回復(fù) 很有用 2011-04-08 11:14:33
唔，握爪， 你跟我做的好像啊。。�！跋掠我镆粯樱嫌我镏徊钜粋�(gè)堿基”。我在兩個(gè)體系中也遇到過(guò)這樣的問(wèn)題，你可以提高退火溫度或加DMSO看看，可能有些是非特異性條帶。。。我原先以為做這個(gè)特異性很難保證，但現(xiàn)在看來(lái)特異性還是可以的，沒(méi)有遇到什么非特異性條帶（我現(xiàn)在已經(jīng)合成一個(gè)體系了） |
2樓2011-04-08 10:19:16
4樓2011-04-08 12:05:12
5樓2011-04-08 13:12:15
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