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李尉濤金蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】電泳時(shí)候，什么時(shí)候用穩(wěn)壓？什么時(shí)候用穩(wěn)流？？？ 已有7人參與
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| 如題所述，電泳時(shí)候，什么時(shí)候用穩(wěn)壓？什么時(shí)候用穩(wěn)流？？？我只知道電泳槽兩端存在電壓差是條帶跑開的動(dòng)力，但是穩(wěn)壓，穩(wěn)流的原因就不知道了。有分子達(dá)人沒？幫小弟解答一下吧。 |
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mamadexiao
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8樓2011-04-09 20:56:44
csdyg
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-04-09 08:36:01
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-04-09 08:36:01
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在電泳的過程中，電壓和電流的大小與板的長(zhǎng)度，緩沖液的pH，離子強(qiáng)度等很多因素都有關(guān)系，而且二者之間又有互相制約的關(guān)系。 一般的電泳儀，可調(diào)的都是最大電壓和最大電流，也許你已經(jīng)注意到了，跑電泳的時(shí)候電壓和電流二者很難同時(shí)都達(dá)到你設(shè)定的值，而是其中一個(gè)值符合，另一個(gè)比你設(shè)定的值要小。 例如你設(shè)定的最大電壓150V，最大電流40mA,這時(shí)由于各種因素的影響，可能實(shí)際情況是這樣的，電壓100V，電流40mA，這樣的時(shí)候就是恒流了，因?yàn)殡妷菏茈娏鞯闹萍s，不能再升高了，而最大電流已經(jīng)達(dá)到了，如果想要調(diào)高電壓，那么就需要把最大電流調(diào)高，電壓才能相應(yīng)升高。也有可能是這樣的情況，電壓150V，電流30mA，這時(shí)候就是恒壓了，同理。 我一般使用恒壓，因?yàn)殡娪具^程中，緩沖液電阻增大，如果保持恒流，有可能使體系過熱導(dǎo)致溶膠。 樓主在跑電泳的時(shí)候只要確定是恒壓還是恒流就可以了，個(gè)人認(rèn)為二者沒有大的差異，只要電壓和電流都達(dá)到了一定的值，都是可以跑出好效果的，祝順利。 |
2樓2011-04-09 06:39:57
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1949stone(金幣+2, EPI+1): 不錯(cuò) 2011-04-09 09:47:42
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
1949stone(金幣+2, EPI+1): 不錯(cuò) 2011-04-09 09:47:42
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1、一般跑核酸用恒壓,而跑蛋白質(zhì)用恒流。 2、需要控制發(fā)熱量時(shí)用恒功率，如轉(zhuǎn)膜的時(shí)候一般會(huì)選擇恒流或者恒功率。 3、SDS-PAGE 一般是恒壓居多；Western Blot一般是恒流居多；核酸的 AE 是兩者差別不大。 4、Gel Shift也是兩者差別不大//注意散熱就行 至于很多人迷惑的為什么恒壓的條件下電流會(huì)緩慢升高的問題請(qǐng)參考下文： http://www.mnstate.edu/provost/FasterDNAGels.pdf 文章索然比較老了 但是論述的是原理性的東東 論述的還可以的 大家都可以看看 [ Last edited by jhu132llh on 2011-4-9 at 09:46 ] |
3樓2011-04-09 09:44:51
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4樓2011-04-09 10:35:48
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