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李尉濤金蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】電泳時(shí)候,什么時(shí)候用穩(wěn)壓?什么時(shí)候用穩(wěn)流??? 已有7人參與
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| 如題所述,電泳時(shí)候,什么時(shí)候用穩(wěn)壓?什么時(shí)候用穩(wěn)流???我只知道電泳槽兩端存在電壓差是條帶跑開的動(dòng)力,但是穩(wěn)壓,穩(wěn)流的原因就不知道了。有分子達(dá)人沒?幫小弟解答一下吧。 |
銀蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
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在電泳的過程中,電壓和電流的大小與板的長(zhǎng)度,緩沖液的pH,離子強(qiáng)度等很多因素都有關(guān)系,而且二者之間又有互相制約的關(guān)系。 一般的電泳儀,可調(diào)的都是最大電壓和最大電流,也許你已經(jīng)注意到了,跑電泳的時(shí)候電壓和電流二者很難同時(shí)都達(dá)到你設(shè)定的值,而是其中一個(gè)值符合,另一個(gè)比你設(shè)定的值要小。 例如你設(shè)定的最大電壓150V,最大電流40mA,這時(shí)由于各種因素的影響,可能實(shí)際情況是這樣的,電壓100V,電流40mA,這樣的時(shí)候就是恒流了,因?yàn)殡妷菏茈娏鞯闹萍s,不能再升高了,而最大電流已經(jīng)達(dá)到了,如果想要調(diào)高電壓,那么就需要把最大電流調(diào)高,電壓才能相應(yīng)升高。也有可能是這樣的情況,電壓150V,電流30mA,這時(shí)候就是恒壓了,同理。 我一般使用恒壓,因?yàn)殡娪具^程中,緩沖液電阻增大,如果保持恒流,有可能使體系過熱導(dǎo)致溶膠。 樓主在跑電泳的時(shí)候只要確定是恒壓還是恒流就可以了,個(gè)人認(rèn)為二者沒有大的差異,只要電壓和電流都達(dá)到了一定的值,都是可以跑出好效果的,祝順利。 |
榮譽(yù)版主 (知名作家)
大洪
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1、一般跑核酸用恒壓,而跑蛋白質(zhì)用恒流。 2、需要控制發(fā)熱量時(shí)用恒功率,如轉(zhuǎn)膜的時(shí)候一般會(huì)選擇恒流或者恒功率。 3、SDS-PAGE 一般是恒壓居多;Western Blot一般是恒流居多;核酸的 AE 是兩者差別不大。 4、Gel Shift也是兩者差別不大//注意散熱就行 至于很多人迷惑的為什么恒壓的條件下電流會(huì)緩慢升高的問題請(qǐng)參考下文: http://www.mnstate.edu/provost/FasterDNAGels.pdf 文章索然比較老了 但是論述的是原理性的東東 論述的還可以的 大家都可以看看 [ Last edited by jhu132llh on 2011-4-9 at 09:46 ] |

榮譽(yù)版主 (文壇精英)
小木蟲生化熊

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