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guoxinfeng金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
瀚海微沙
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[交流]
【求助/交流】病毒RNA提取過(guò)程中的OligdT問(wèn)題 已有1人參與
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請(qǐng)教以下問(wèn)題： 1.反轉(zhuǎn)錄中用到的通用引物OligdT15、OligdT 18,OligdT 20等是不是都可以用于RNA提取，有何差別？ 2.病毒上清液做瓊脂擴(kuò)散可檢測(cè)的到沉淀線，但Trizol法提取病毒RNA，總是提不出來(lái)，同時(shí)提取的病毒感染組織（有典型病變，免疫熒光可以檢測(cè)到病毒顆粒）中總RNA，也檢測(cè)不到病毒，但是看家基因及各種因子，提取良好,可能原因？ 3.用此病毒引物擴(kuò)增以前構(gòu)建好的病毒質(zhì)粒，PCR后，凝膠結(jié)果圖良好。 出現(xiàn)好多問(wèn)題，懇請(qǐng)各位高手指點(diǎn)！！ |
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myfinalway
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dhd997(金幣+3): good 2011-04-13 13:28:17
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
dhd997(金幣+3): good 2011-04-13 13:28:17
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1、15就是15T堿基。 18就是18個(gè)T堿基，，，，，根據(jù)你的病毒來(lái)選取，一般是18. 2、可能沉淀線是非特異的，就是血清雜蛋白的反應(yīng)，也有可能是擴(kuò)病毒的引物設(shè)計(jì)不對(duì)或者反應(yīng)條件問(wèn)題。 3、先排除上面的原因，再看這個(gè)。如果上面原因排除了引物可以擴(kuò)質(zhì)粒，那就是非特異擴(kuò)增。 |
2樓2011-04-13 11:52:06
guoxinfeng
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3樓2011-04-20 16:27:48
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