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chengjg木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【討論】苯酚硫酸法交流 已有17人參與
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| 我做苯酚硫酸法測定多糖，前幾天硫酸用完了，今天買了一瓶新的，可是做實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)用剛買的硫酸做時空白都是深紅色的樣品顏色更深，沒法做，稀釋十倍才能有差別，請問一下大家又沒遇到這樣情況，還是我買的硫酸出問題了？ |
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yu27317961
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
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你說的這種現(xiàn)象的確很常見，即使同一個人操作，2天檢測同一個樣品的結(jié)果也有很大的差距。 硫酸在本檢測方法中的作用是水解多糖，但是高濃度的硫酸也有很強(qiáng)的氧化性，脫水性，試驗(yàn)檢測的誤差在硫酸這塊的有很大。 苯酚在檢測中試起到與醛、酮糖結(jié)合顯色的作用 試驗(yàn)操作中苯酚被氧化顯色，肯定是增大檢測結(jié)果。 但是若果苯酚被氧化，則無法檢測多糖是否全部參與顯色，結(jié)果至少是低于實(shí)際值的。 兩種情況一加一減，最終的結(jié)果很難說 樣品+蒸餾水，+苯酚（迅速 搖勻），+濃硫酸（迅速搖勻） 相信你在檢測的時候也遇到了，硫酸不同加法的不同顯色結(jié)果 沿壁--硫酸沉降在底部，可以很明顯的看見顯色是從不同密度的界面開始生成的 沿壁+旋轉(zhuǎn)比色管---控制硫酸添加速度，可以看到顏色是從比色管壁開始生成，逐漸向中間生成 我個人就覺得旋轉(zhuǎn)比色管沿壁加時，同一位置硫酸濃度增加相對來說較慢，避免了硫酸那多增加過快而增大了其氧化性的副作用。 另外，比色管選用25ml的比10ml的要好些吧，降低液面高度�？梢院芸斓幕靹驑悠�。 [ Last edited by yu27317961 on 2011-4-19 at 09:19 ] |
8樓2011-04-19 09:17:18
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