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[交流]
【求助/交流】怎么鑒別植物細(xì)胞是活著還是死了,有任何想法的都請不吝指教,謝謝
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我這邊需要鑒定木頭是否經(jīng)過了80度以上的熱處理。我想處理后植物細(xì)胞肯定死了,所以想通過鑒定植物細(xì)胞是活著還是死了的方法來判定是否經(jīng)過了6小時80度的熱處理。我們知道活著的細(xì)胞有滲透壓,死后就沒了,可不可以把部分木頭浸泡在某種顏色的溶液中,通過顯微鏡來觀察細(xì)胞內(nèi)是否有顏色來判定。 1 如果可以,請教一下一般用哪種溶液,本人不是很懂這方面的請指教。 2 如果不可以,還有什么辦法。 3 如果您有什么好辦法都可以說說,再次先說聲謝謝了。 |
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活體染色是利用某種對植物無害的染料稀溶液進行活細(xì)胞染色的技術(shù)。中性紅是常用的活體染料之一,它是一種堿性染料,也是一種弱堿性PH指示劑,變色范圍在PH6.8—8.0之間(由紅變黃)。在中性或微堿性環(huán)境中,植物的活細(xì)胞能大量吸收中性紅并向液泡內(nèi)排泌。由于液泡通常呈酸性反應(yīng),因此進入液泡的中性紅呈現(xiàn)櫻桃紅色, 在這種情況下,原生質(zhì)和細(xì)胞壁一般不著色。死細(xì)胞由于膜的選擇透性消失,液泡破壞,因此不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象。但中性紅的陽離子卻與帶有一定負(fù)電荷的原生質(zhì)及細(xì)胞核結(jié)合,使原生質(zhì)和細(xì)胞核染色。本實驗需要如下材料和用具:洋蔥鱗莖、小麥葉片或紫鴨跖草葉片、刀片、尖頭鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、0.03%中性紅溶液、1M硝酸鉀溶液、酒精燈。實驗步驟: 1.削取較幼嫩的洋蔥鱗片,在內(nèi)表面切割5平方毫米左右的方形切痕,用尖鑷子撕下這塊內(nèi)表皮,投入0.03%的中性紅溶液中。如用小麥葉片,表皮不易撕取,可把葉片平放載玻片上,加水蘸濕,用刀片輕輕刮去上表皮、葉肉和葉脈,只留下一層下表皮,再切割成5平方毫米的小片。 2.染色10-15分鐘后取出,用蒸餾水稍加沖洗,在低倍鏡下觀察,此時主要是細(xì)胞壁染色,原生質(zhì)和液泡不著色。 3.將制片放在自來水(PH略高于7.0)中浸泡10-15分鐘,再進行顯微觀察,此時細(xì)胞壁完且脫色,液泡染成均勻的櫻桃紅色,細(xì)胞核和原生質(zhì)不著色。 4.將染好的表皮浸入1M的硝酸鉀溶液中,約10分鐘后取出觀察。由于鉀離子能使原生質(zhì)膨脹,發(fā)生帽狀質(zhì)壁分離,因此能清楚地看到無色透明的原生質(zhì)和染為紅色的液泡。 5.將表皮組織加熱或酒精浸泡,殺死細(xì)胞后再染色,則可看到死細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核都染上顏色,而看不到活細(xì)胞具有的液泡染色現(xiàn)象。 如將步驟3中的活染制片在酒精燈火焰上微微加熱,以殺死細(xì)胞,也可看到原生質(zhì)呈不均勻的凝膠狀,與細(xì)胞核一起被染成紅色。另外,在活染制片中仔細(xì)尋找,也可能看到個別死細(xì)胞,經(jīng)中性紅染色后其細(xì)胞核清晰可辨。 |
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