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[交流]
微生物純培養(yǎng)問題 已有12人參與
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誰知道微生物純培養(yǎng)技術中的稀釋倒平板法和涂布平板法的區(qū)別�。吭诰�等~ [ Last edited by 分子結構 on 2011-4-20 at 13:19 ] |
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hwlightning
銅蟲 (初入文壇)
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3樓2011-04-20 16:59:14
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rainwander(金幣+2, EPI+1): 鼓勵交流~~~ 2011-04-20 18:08:14
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rainwander(金幣+2, EPI+1): 鼓勵交流~~~ 2011-04-20 18:08:14
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一、稀釋倒平板法（傾注平板法） 先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …），然后分別取不同稀釋液少許，與已溶化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時間即可出出菌落。如果稀釋得當，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落，或重復以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。 二、涂布平板法 首先把微生物懸液通過適當?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃涂棒把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。 我覺得涂布平板法比稀釋倒平板法更方便些，工作量要少點。而且在稀釋倒平板法（傾注平板法）中，細菌不易分散或長成菌落連在一起。 樓主可以參看沈萍、陳向東編寫的第四版《微生物學實驗》第28頁至34頁的內(nèi)容。 |
4樓2011-04-20 17:12:09
5樓2011-04-20 17:56:05
冼亮淀粉酶
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生物大分子降解酶
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
scelab(金幣+9, EPI+1): very good 2011-04-21 00:20:52
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
scelab(金幣+9, EPI+1): very good 2011-04-21 00:20:52
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最重要的區(qū)別一共有三點 1、稀釋倒平板法一次倒平板數(shù)量較多，因為一瓶培養(yǎng)基有好幾十毫升，或者上百，能倒6塊直徑9厘米的平板了。當然如果把培養(yǎng)基裝到小的三角瓶里也行。就別把培養(yǎng)基裝到試管里了，因為有些培養(yǎng)基經(jīng)過兩次滅菌之后成分可能有變化�；蛘吲渲婆囵B(yǎng)基的時候把瓊脂粉裝到試管里，滅完菌之后要記得搖勻，要不然有可能管底的培養(yǎng)基凝固好了，上部分卻是一抖就碎，不過沒什么實質(zhì)性影響。 稀釋涂平板法隨便涂板多少塊都行，想涂少的時候，就比稀釋倒平板法有優(yōu)勢。 2、稀釋倒平板法由于部分微生物分布于培養(yǎng)基內(nèi)部，缺乏氣體，所以能分離得到兼性厭氧、好氧微生物和厭氧微生物，而稀釋涂平板法由于微生物只能生長在表面，所以能分離得到兼性厭氧和好氧微生物，不能分離得到厭氧微生物。 3、稀釋倒平板法由于有的細菌可能不耐熱，而有時候每個人的經(jīng)驗有偏差，溫度稍高的時候就把菌液加進去了，可能有微生物死亡。但稀釋涂平板法沒有這個顧慮。 做實驗之前記清楚步驟很重要，但更重要的是分析方法之間的差別，明白選用某種方法涉及到的原因，思考很重要，要不然碩士博士就跟中專生技術工一樣了。不針對誰，只是有感而發(fā)。 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-20 at 23:11 ] |
6樓2011-04-20 22:55:06
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