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分子結(jié)構(gòu)金蟲(chóng) (小有名氣)
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微生物純培養(yǎng)問(wèn)題 已有12人參與
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誰(shuí)知道微生物純培養(yǎng)技術(shù)中的稀釋倒平板法和涂布平板法的區(qū)別。吭诰等~ [ Last edited by 分子結(jié)構(gòu) on 2011-4-20 at 13:19 ] |

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一、稀釋倒平板法(傾注平板法) 先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的稀釋(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分別取不同稀釋液少許,與已溶化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出出菌落。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落,這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。 二、涂布平板法 首先把微生物懸液通過(guò)適當(dāng)?shù)南♂,取一定量的稀釋液放在無(wú)菌的已經(jīng)凝固的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,然后用無(wú)菌的玻璃涂棒把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個(gè)菌落。 我覺(jué)得涂布平板法比稀釋倒平板法更方便些,工作量要少點(diǎn)。而且在稀釋倒平板法(傾注平板法)中,細(xì)菌不易分散或長(zhǎng)成菌落連在一起。 樓主可以參看沈萍、陳向東編寫(xiě)的第四版《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》第28頁(yè)至34頁(yè)的內(nèi)容。 |

銅蟲(chóng) (初入文壇)
金蟲(chóng) (小有名氣)

專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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最重要的區(qū)別一共有三點(diǎn) 1、稀釋倒平板法一次倒平板數(shù)量較多,因?yàn)橐黄颗囵B(yǎng)基有好幾十毫升,或者上百,能倒6塊直徑9厘米的平板了。當(dāng)然如果把培養(yǎng)基裝到小的三角瓶里也行。就別把培養(yǎng)基裝到試管里了,因?yàn)橛行┡囵B(yǎng)基經(jīng)過(guò)兩次滅菌之后成分可能有變化;蛘吲渲婆囵B(yǎng)基的時(shí)候把瓊脂粉裝到試管里,滅完菌之后要記得搖勻,要不然有可能管底的培養(yǎng)基凝固好了,上部分卻是一抖就碎,不過(guò)沒(méi)什么實(shí)質(zhì)性影響。 稀釋涂平板法隨便涂板多少塊都行,想涂少的時(shí)候,就比稀釋倒平板法有優(yōu)勢(shì)。 2、稀釋倒平板法由于部分微生物分布于培養(yǎng)基內(nèi)部,缺乏氣體,所以能分離得到兼性厭氧、好氧微生物和厭氧微生物,而稀釋涂平板法由于微生物只能生長(zhǎng)在表面,所以能分離得到兼性厭氧和好氧微生物,不能分離得到厭氧微生物。 3、稀釋倒平板法由于有的細(xì)菌可能不耐熱,而有時(shí)候每個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)有偏差,溫度稍高的時(shí)候就把菌液加進(jìn)去了,可能有微生物死亡。但稀釋涂平板法沒(méi)有這個(gè)顧慮。 做實(shí)驗(yàn)之前記清楚步驟很重要,但更重要的是分析方法之間的差別,明白選用某種方法涉及到的原因,思考很重要,要不然碩士博士就跟中專生技術(shù)工一樣了。不針對(duì)誰(shuí),只是有感而發(fā)。 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-20 at 23:11 ] |

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