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為什么DNA提取總降解
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目的：從一種絲狀真菌中提取DNA進(jìn)行基因組測(cè)序。 問題：使用過多種方法進(jìn)行提取（液氮研磨、珠打、玻璃棒研磨等）。提取最后樣品加TE/水溶解后樣品呈乳白色，看不到通常DNA的絮狀沉淀。跑膠檢測(cè)，RNA條帶非常亮，看不到DNA條帶或者帶很弱。樣品提取之后曾使用RNase進(jìn)行處理、使用常規(guī)方法提取后過柱子回收DNA、在提取過程中在CTAB溫育之前進(jìn)行RNase的處理等。該DNA樣品含有很多RNA，需要處理掉RNA，但是其DNA對(duì)酶極其敏感，甚至沸水處理了半小時(shí)的RNase溶液加入樣品中也可以造成DNA的降解，包括過柱子的方法也造成DNA的降解。 說明：該菌含多糖較多，生長(zhǎng)緩慢 請(qǐng)高人指教！ |
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xuguanghai
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