本帖產(chǎn)生 1 個(gè) 翻譯EPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看

wenjie

金蟲 (小有名氣)

雨霽

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 1044
紅花: 1
帖子: 62
在線: 66.1小時(shí)
蟲號(hào): 1210971
注冊(cè): 2011-02-23
性別: MM
專業(yè): 涂料

[求助] 翻譯

Extraction of Total RNA and RT-PCR
Total RNA was extracted from lung and liver
tissues (20mg) using RNeasy mini protection kit
from QIAGEN according to the supplier·s guideline
.The concentration and purity of the extracted
RNA were checked spectrophotometrically by mea-
suring 260/280 absorption ratios.The primer pair
for ASTIV was designed in our laboratory using
the Gene Fishe rprimer designing and Multialign-ment software.Usingtheforwardprimer(FP)5`-GTGTCCTATGGGTCGTGGTA-3`
/reverseprimer(RP)5`-TTCTGGGCTACAGTGAAGGTA-3 (GenBank acces-
sion no.X52883),the299-bp AST IV cDNA was syn-thesized.The 264-bp STa cDNA was synthesized using the primer pair FP 5`-TCCTCAAAGGATATGTTCCG-
3`/RP 5`-CAGTTCCTTCTCCATGAGAT-3` (GenBank
accession no.M33329).The specificity of all primers was tested using the BLAST from the National Cen-terfo rBiotechnology Information Open Reading Frame
software.cDNA synthesis from total 1 ug of liverand
2 ug of lung RNA was performed in a 50 uL reaction
mixture.Concentrations of the different ingredients
used followed the supplier·s guidelines. Forinterna
control,500-bp cDNA of rat β-actin was synthesized
from the same amount of RNA from respective sources.
The prime rpair FP5`-GATGTACGTAGCCATCCA-3`/RP5`-GTGCCAACCAGACAGCA-3` for the synthesis of rat β-actin cDNA was designed in our laboratory
using the software mentioned above.

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700）已經(jīng)有10人回復(fù)
求材料調(diào)劑已經(jīng)有10人回復(fù)
本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
國(guó)自科面上基金字體已經(jīng)有8人回復(fù)
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名已經(jīng)有11人回復(fù)
材料專碩英一數(shù)二306 已經(jīng)有5人回復(fù)
085600材料與化工調(diào)劑 324分已經(jīng)有9人回復(fù)
0703化學(xué)調(diào)劑已經(jīng)有12人回復(fù)
0703化學(xué) 305求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留已經(jīng)有10人回復(fù)

開心書蟲

1樓 2011-05-18 21:36:22

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

8814402

至尊木蟲 (職業(yè)作家)

翻譯EPI: 509
應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
貴賓: 0.381
金幣: 12916.1
散金: 47
紅花: 16
帖子: 4183
在線: 357.8小時(shí)
蟲號(hào): 1184404
注冊(cè): 2011-01-06
專業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問題

【答案】應(yīng)助回帖

★
sltmac(金幣+1): 謝謝交流~~ 2011-05-19 08:03:03

總RNA的提取和RT-PCR
使用QIAGEN 的RNeasy mini protection 試劑盒，從20mg肺和肝組織提取總RNA。提取的RNA的難度和純度通過分光光度計(jì)測(cè)定260/280nm吸收度的比值加以確定。引物由本實(shí)驗(yàn)室使用Gene Fisher 引物設(shè)計(jì)和多重校正軟件設(shè)計(jì)。使用正向引物（FP）5`-GTGTCCTATGGGTCGTGGTA-3` / 反向引物 (RP) 5`-TTCTGGGCTACAGTGAAGGTA-3 (GenBank獲取編號(hào)：X52883),合成了299-bp 的AST IV cDNA。264-bp的 STa cDNA 通過使用如下引物對(duì)合成： FP 5`-TCCTCAAAGGATATGTTCCG- 3`/RP 5`-CAGTTCCTTCTCCATGAGAT-3` (GenBank獲取編號(hào)：M33329)。引物特異性通過國(guó)家生物信息技術(shù)中心的開放閱讀框軟件的BLAST測(cè)試。cDNA 的合成由總共1 ug的肝RNA和2 ug 的肺 RNA 在50 uL反應(yīng)混合物中進(jìn)行。各種試劑按照供應(yīng)商的指定濃度加入。作為質(zhì)控，以相同數(shù)量相應(yīng)來源的RNA合成了500-bp的大鼠β-肌動(dòng)蛋白cDNA。合成β-肌動(dòng)蛋白 cDNA的引物對(duì)FP 5`-GATGTACGTAGCCATCCA-3`/RP 5`-GTGCCAACCAGACAGCA-3`有本實(shí)驗(yàn)室以前述軟件設(shè)計(jì)。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

2樓2011-05-19 08:00:16

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

8814402

至尊木蟲 (職業(yè)作家)

翻譯EPI: 509
應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
貴賓: 0.381
金幣: 12916.1
散金: 47
紅花: 16
帖子: 4183
在線: 357.8小時(shí)
蟲號(hào): 1184404
注冊(cè): 2011-01-06
專業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問題

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wenjie(金幣+5, 翻譯EPI+1): 可以 2011-05-21 14:27:12
sltmac(金幣+5): 金幣是給的太少了~~~ 2011-05-27 09:44:30

總RNA的提取和RT-PCR
使用QIAGEN 的RNeasy mini protection 試劑盒，從20mg肺和肝組織提取總RNA。提取的RNA的濃度和純度通過分光光度計(jì)測(cè)定260/280nm吸收度的比值加以確定。引物由本實(shí)驗(yàn)室使用Gene Fisher 引物設(shè)計(jì)和多重校正軟件設(shè)計(jì)。使用正向引物（FP）5`-GTGTCCTATGGGTCGTGGTA-3` / 反向引物 (RP) 5`-TTCTGGGCTACAGTGAAGGTA-3 (GenBank獲取編號(hào)：X52883),合成了299-bp 的AST IV cDNA。264-bp的 STa cDNA 通過使用如下引物對(duì)合成： FP 5`-TCCTCAAAGGATATGTTCCG- 3`/RP 5`-CAGTTCCTTCTCCATGAGAT-3` (GenBank獲取編號(hào)：M33329)。引物特異性通過國(guó)家生物信息技術(shù)中心的開放閱讀框軟件的BLAST測(cè)試。cDNA 的合成由總共1 ug的肝RNA和2 ug 的肺 RNA 在50 uL反應(yīng)混合物中進(jìn)行。各種試劑按照供應(yīng)商的指定濃度加入。作為質(zhì)控，以相同數(shù)量相應(yīng)來源的RNA合成了500-bp的大鼠β-肌動(dòng)蛋白cDNA。合成β-肌動(dòng)蛋白 cDNA的引物對(duì)FP 5`-GATGTACGTAGCCATCCA-3`/RP 5`-GTGCCAACCAGACAGCA-3`由本實(shí)驗(yàn)室用前述軟件設(shè)計(jì)。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

3樓2011-05-19 09:25:58

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

liqi9673

木蟲 (正式寫手)

翻譯EPI: 24
應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 2460.5
散金: 1015
紅花: 3
帖子: 646
在線: 96.5小時(shí)
蟲號(hào): 892832
注冊(cè): 2009-11-03
專業(yè): 電化學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

wenjie(金幣+3): 可以 2011-05-21 14:28:17

總RNA的提取和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
根據(jù)供應(yīng)商的試劑盒上面的要求，使用RNeasy迷你保護(hù)組件，從肺和肝臟組織(20mg)中提取總RNA。通過測(cè)量吸收系數(shù)260/280來檢測(cè)提取RNA的純度和濃度。在實(shí)驗(yàn)室里，我們使用這個(gè)GF設(shè)計(jì)和Multialign-ment軟件對(duì)ASTIV引物進(jìn)行設(shè)計(jì)。使用正向引物（FP）5`-GTGTCCTATGGGTCGTGGTA-3`/反向引物 (RP) 5`-TTCTGGGCTACAGTGAAGGTA-3 (基因編號(hào)：X52883)，來合成299-bp AST IV cDNA。運(yùn)用正向引物5`-TCCTCAAAGGATATGTTCCG-
3`/RP 5`-CAGTTCCTTCTCCATGAGAT-3` (基因編號(hào)：M33329)，來合成 264-bp STa cDNA 。使用國(guó)家生物信息公開閱讀框架軟件 BLAST 測(cè)試所有引物的特性。將總量1ug肝臟的互補(bǔ)DNA和2ug肺的RNA混合為50 uL，進(jìn)行反應(yīng)。根據(jù)供應(yīng)商的要求使用不同材料的濃聚物。質(zhì)控方面，以各自來源的相同數(shù)量的RNA合成大鼠β-肌動(dòng)蛋白500-bp的cDNA。在實(shí)驗(yàn)室使用上面提到的軟件，通過對(duì)引物FP 5`-GATGTACGTAGCCATCCA-3`/RP 5`-GTGCCAACCAGACAGCA-3`進(jìn)行設(shè)計(jì)，合成大鼠β-肌動(dòng)蛋白 cDNA。

贊一下

回復(fù)此樓

帶著靈魂漫步

4樓2011-05-19 10:20:08

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

8814402

至尊木蟲 (職業(yè)作家)

翻譯EPI: 509
應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
貴賓: 0.381
金幣: 12916.1
散金: 47
紅花: 16
帖子: 4183
在線: 357.8小時(shí)
蟲號(hào): 1184404
注冊(cè): 2011-01-06
專業(yè): 藥物學(xué)其他科學(xué)問題

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
ringzhu(金幣+2): O(∩_∩)O哈哈~ 博士哥哥要罷工咯~~ 2011-05-25 12:25:24

說實(shí)話，樓主給的金幣太少了，還只給部分！以后自己啃把

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

5樓2011-05-23 07:49:31

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]	作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 304求調(diào)劑 +6	司空. 2026-03-18	6/300	2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 321求調(diào)劑 +3	何潤(rùn)采123 2026-03-18	3/150	2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5	想上岸的鯉魚 2026-03-18	6/300	2026-03-18 17:53 by 無際的草原
[考研] 331求調(diào)劑（0703有機(jī)化學(xué) +7	ZY-05 2026-03-13	8/400	2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3	Eember. 2026-03-17	9/450	2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專碩339分求調(diào)劑 +3	木子momo青爭(zhēng) 2026-03-15	3/150	2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3	藥學(xué)chy 2026-03-15	4/200	2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 304求調(diào)劑 +4	ahbd 2026-03-14	4/200	2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5	ly3471z 2026-03-13	5/250	2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 285求調(diào)劑 +6	ytter 2026-03-12	6/300	2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3	自由煎餅果子 2026-03-16	3/150	2026-03-16 14:10 by 運(yùn)氣yunqi
[考研] 070305求調(diào)劑 +3	mlpqaz03 2026-03-14	4/200	2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3	孟鑫材料 2026-03-14	3/150	2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8	dream…… 2026-03-12	8/400	2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 材料工程調(diào)劑 +9	咪咪空空 2026-03-12	9/450	2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] ［0860］321分求調(diào)劑，ab區(qū)皆可 +4	寶貴熱 2026-03-13	4/200	2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 0856材料與化工301求調(diào)劑 +5	奕束光 2026-03-13	5/250	2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 311求調(diào)劑 +3	冬十三 2026-03-13	3/150	2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 290求調(diào)劑 +7	ADT 2026-03-12	7/350	2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +3	崔wj 2026-03-12	4/200	2026-03-12 19:33 by 求調(diào)劑zz