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songwangpan金蟲 (小有名氣)
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用葡萄糖氧化酶做循環(huán)伏安法時候出不來峰值
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我在鐵氰化鉀溶液中用循環(huán)伏安法測試，可以出的來峰值 但是在電極上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循環(huán)伏安法測試， 卻出不了峰值 是因?yàn)槊甘Щ钸�是因?yàn)閯e而原因呢，平時酶都是在4℃下保存，操作也基本沒有在 室溫下太久 PS. 之前如果把酶滴在材料上，酶會消失，現(xiàn)在的方法是把酶和材料混合在一起， 再滴入電極上 |
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songwangpan(金幣+12): 你說的和我做的是一樣的，那通氮?dú)獬醯腜BS里到底需不需要加上葡萄糖呀？ 2011-05-27 10:33:34
justinzhao(ECEPI+1): 獎勵應(yīng)助！呵呵 2011-05-27 11:48:35
justinzhao(ECEPI+1): 獎勵應(yīng)助！呵呵 2011-05-27 11:48:35
| 同學(xué) 估計(jì)你是在打磨后的電極表面上修飾了納米材料吧 這個時候 你應(yīng)該把空白電極和修飾好了的電極在鐵氰化鉀溶液（最好選用鐵氰化鉀、亞鐵氰化鉀電對（5mM, 1:1）并以以0.1M KCl為支持電解質(zhì)）中做CV掃描，如果你的修飾物為導(dǎo)電的，則修飾電極的電流應(yīng)該比空白電極大，這只是證明納米材料可以導(dǎo)電的。嗯，之后你可能是用滴涂法在電極表面滴涂GOD吧，假設(shè)你的GOD固定在了電極表面且沒有失活 那么在通氮除氧的PBS中，在0.1V到-0.7V的電位窗口，能夠在-0.4到-0.6V左右（SCE、Ag/AgCl）能夠看到GOD的循環(huán)伏安峰。如果沒有，那么你的GOD多半沒有固定上去。失沒失活，因?yàn)槲覜]做過，就不好說了，請參照7樓那位同學(xué)的方法試試。此外，向PBS中通氧或者通氮的現(xiàn)象是不同的，請多看看文獻(xiàn)吧。呵呵，恭祝實(shí)驗(yàn)順利。 |
9樓2011-05-26 20:39:45
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3樓2011-05-26 08:41:11
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【答案】應(yīng)助回帖
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justinzhao(金幣+3): 獎勵應(yīng)助 2011-05-27 11:48:00
justinzhao(金幣+3): 獎勵應(yīng)助 2011-05-27 11:48:00
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在鐵氰化鉀溶液中用循環(huán)伏安法測試，出峰 ，只能說明你的電極沒問題。 在電極上加入葡萄糖氧化酶后，在葡萄糖+PBS溶液中，用循環(huán)伏安法測試，你掃描的如果是正電位區(qū)，應(yīng)該會有峰。這個峰是過氧化氫產(chǎn)生的。掃負(fù)電位區(qū)，需要除氧，這是酶在電極上的直接電化學(xué)。 判斷是否是酶失活的方法，可以把電極電位設(shè)在+0.8V左右，用電流時間曲線法，試試加葡萄糖前后是否有電流的變化。 |
7樓2011-05-26 10:39:23
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6樓2011-05-26 10:01:24
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10樓2011-05-27 08:34:18
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justinzhao(金幣+3): 獎勵應(yīng)助 2011-05-27 11:47:04
justinzhao(金幣+3): 獎勵應(yīng)助 2011-05-27 11:47:04
| 嗯 我覺得要分成兩個實(shí)驗(yàn)做：1. 如果在通氮除氧的PBS中作出GOD的氧化還原峰了，建議你先做掃速與峰電流、峰電位的關(guān)系實(shí)驗(yàn)。這個實(shí)驗(yàn)完成后，就可以向PBS中加入葡萄糖，攪拌，然后停止，在不攪拌的條件下在相同的電位窗口下做循環(huán)伏安實(shí)驗(yàn)，看此時的還原峰電流或者氧化峰電流有沒有變化（增大或者減小都可以，有變化就行。我在通氮除氧的PBS得到的結(jié)果是加入葡萄糖后，還原峰電流增大）。2. 如果你在空白PBS中沒有得到一對明顯的氧化還原峰，就不用再加入葡萄糖了，因?yàn)闆]有峰出現(xiàn)就說明GOD根本沒上去，即使加入葡萄糖也應(yīng)該沒有響應(yīng)。 |
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周少爺16樓2011-05-27 11:14:14
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插上一句，我做的是酶電極，不過不是滴涂法！做酶傳感器，有的時候CV圖真的不好做出來，比如待測物濃度大了就測不出來了等等。后來我用ＤＰＶ做了，發(fā)現(xiàn)效果很好．但是翻閱文獻(xiàn)，做酶的基本上都是用i-t曲線來做的，i-t曲線時間間隔短的話，就會呈現(xiàn)一個向下的弧線，而根本就不應(yīng)該是呈階梯狀的曲線。上面有蟲友說有可能是用 orgin平滑了，我覺得應(yīng)該有點(diǎn)；但是主要還是他們把時間拉長了，比如時間間隔1min，或者5min，這樣就可以做出階梯狀的曲線。 另外，電極捕捉h2o2是個相對緩慢的過程（相對與鐵氰化鉀探針分子來說），所以說做cv圖的時候是不是得靜止一段時間，不然數(shù)據(jù)會很不穩(wěn)定的！ |
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