 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3821 | 回復(fù): 17 | |||||
死掉的洋蔥新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的測定方法 已有10人參與
|
| 我是第一次發(fā)帖，也沒有金幣可以貢獻(xiàn)，不過希望大家?guī)蛶兔�，我用的是分光光度計來測定葡萄糖氧化酶的酶活，可是每次測定的值和實(shí)際值相差很多，大家看看還有沒有其他的方法可以測定葡萄糖氧化酶的酶活！謝謝各位大俠了！ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 酶工程 | 生工檢測理論與實(shí)務(wù) |
» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之小鼠實(shí)驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有200人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 葡萄糖氧化酶在玻碳電極上直接出峰了？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 葡萄糖氧化酶修飾電極的直接電化學(xué)行為
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 請問有沒有大俠知道真菌漆酶酶活的測定方法，感激不盡
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 葡萄糖氧化酶的直接電化學(xué)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 急求�。≈参锶~片中硝酸還原酶、谷酰胺合成酶、天門冬酰胺合成酶活性的測定方法
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 關(guān)于測定筍的多酚氧化酶PPO活性的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 葡萄糖氧化酶的相對分子質(zhì)量是多少
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 求測定谷氨酰胺酶酶活的標(biāo)準(zhǔn)方法，包括分解和轉(zhuǎn)化的酶活，還有些別的困惑，望關(guān)注
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 用葡萄糖氧化酶做循環(huán)伏安法時候出不來峰值
已經(jīng)有38人回復(fù)
2樓2010-05-26 11:09:13
3樓2010-05-26 15:45:27
死掉的洋蔥
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 32.8
- 散金: 1
- 帖子: 25
- 在線: 3.9小時
- 蟲號: 1023682
- 注冊: 2010-05-20
- 專業(yè): 色譜分析
4樓2010-05-26 15:49:51
死掉的洋蔥
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 32.8
- 散金: 1
- 帖子: 25
- 在線: 3.9小時
- 蟲號: 1023682
- 注冊: 2010-05-20
- 專業(yè): 色譜分析
5樓2010-05-26 15:56:47
6樓2010-05-26 16:31:31
死掉的洋蔥
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 32.8
- 散金: 1
- 帖子: 25
- 在線: 3.9小時
- 蟲號: 1023682
- 注冊: 2010-05-20
- 專業(yè): 色譜分析
|
我使用的檢驗原理是： 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成D-吡喃葡萄糖酸-1,5-內(nèi)酯以及過氧化氫。就是利用反應(yīng)生成的過氧化氫將還原性染料（鄰聯(lián)茴香氨）轉(zhuǎn)化為氧化性染料，反應(yīng)條件是25攝氏度，pH為7.0。 檢測方法是： 將配置好的底物溶液（0.066mg/mL的鄰聯(lián)茴香氨溶液、10%葡萄糖溶液、過氧化氫溶液）放在25攝氏度水浴鍋中平衡5分鐘，然后加入稀釋至0、2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液，放入分光光度計中436nm下記錄5min內(nèi)吸光度值的鄭家，根據(jù)線性曲線計算每分鐘吸光度值的變化量（△E），根據(jù)公式：Volume activity（U/mL）=△E*3.72*稀釋因子計算酶活 購買過來的葡萄糖氧化酶瓶身上有標(biāo)記的酶活，然后我們將測得的酶活和標(biāo)記的酶活做對比，計算百分比，但是每次我測得的百分比都要沒有達(dá)到100%正負(fù)10%范圍內(nèi)，那說明我的酶活測定肯定有問題，酶蛋白是不需要測定的。 |
7樓2010-05-27 10:35:04
死掉的洋蔥
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 32.8
- 散金: 1
- 帖子: 25
- 在線: 3.9小時
- 蟲號: 1023682
- 注冊: 2010-05-20
- 專業(yè): 色譜分析
8樓2010-05-28 11:26:39
★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+3):很好的經(jīng)驗~~ 2010-05-29 21:27:13
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+3):很好的經(jīng)驗~~ 2010-05-29 21:27:13
| 我只能給出大概的建議，不保證一定正確啊。測定酶活性應(yīng)該在底物過量的前提下，測定初始酶活，對嗎？看到你所給出的體系中，有標(biāo)準(zhǔn)的0.2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液，能否這樣做？將這個0、2U/mL的葡萄糖氧化酶溶液再稀釋2、4、8倍，根據(jù)你的方法獲得分別稀釋0、2、4、8倍的酶活單位，然后將這四個數(shù)字進(jìn)行線性擬合。如果這四個數(shù)值擬合R2值在95%以上，你就可以大概認(rèn)為這是一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后按照你所說的偏差值進(jìn)行一次換算即可，不必非要考慮酶活是否有問題了。不知道我講清楚了沒有？祝你好運(yùn)。 |
9樓2010-05-29 20:07:34
死掉的洋蔥
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 32.8
- 散金: 1
- 帖子: 25
- 在線: 3.9小時
- 蟲號: 1023682
- 注冊: 2010-05-20
- 專業(yè): 色譜分析
10樓2010-06-01 10:27:55
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 死掉的洋蔥 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 一志愿廈門大學(xué)化學(xué)學(xué)碩307求調(diào)劑
+10
|
y7czhao 2026-03-26 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)0703 調(diào)劑 306分 一志愿211 +3 | 26要上岸 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +15 | hhhhxn.. 2026-03-23 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +4 | A child 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +7 | 安憶靈 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 315調(diào)劑 +4 | 0860求調(diào)劑 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +7 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 351求調(diào)劑 +4 | 麥克阿磊 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥292求調(diào)劑 +6 | 小小陳小小 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿河工大 081700 276求調(diào)劑 +4 | 地球繞著太陽轉(zhuǎn) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)339材料與化工求調(diào)劑 +3 | 江往賣魚 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | 話梅糖111 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航材料專317分求調(diào)劑 +5 | 炸呀炸呀炸薯條 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|